脓毒症大鼠肺组织线粒体内HMGB1与线粒体损伤关系的实验研究

摘要

目的:
　　通过荧光定量PCR检测高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在脓毒症大鼠肺脏组织的表达量，以及JC-1荧光探针结合激光共聚焦显微镜研究脓毒症时大鼠肺组织线粒体损伤程度，最终分析HMGB1在线粒体内的表达水平和线粒体损伤程度之间关系，探讨脓毒症致肺组织线粒体损伤的可能机理，以寻求脓毒症肺保护的有效途径。
　　方法:
　　取SPF级SD大鼠50只（雌雄不拘，体重180-200克），随机分为实验组和对照组，每组25只。实验组采用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症模型，对照组除不行CLP外，其他处理同实验组。各组分别在造模后6h，12h，24h，48h，72h时间点处死大鼠，取新鲜肺组织100mg提取线粒体，立即用激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位，并采用荧光实时定量PCR技术检测线粒体HMGB1的表达水平。
　　结果:
　　1脓毒症组肺组织的线粒体膜电位水平较假手术组显著下降（P＜0.01），且随着手术时间推移，脓毒症组线粒体膜电位水平呈显著下降趋势（P＜0.01）。提示线粒体损伤程度在12h达到高峰，24h、48h有所减弱，在72h又显著增强。
　　2脓毒症组各时间点肺组织线粒体HMGB1的表达较假手术组显著增强(P＜0.01)，且随着手术时间推移，HMGB1的表达在12h达到高峰，24h、48h有所下降，在72h再次达到峰值。
　　3线粒体损伤程度同HMGB1的表达水平呈显著正相关（r=0.709）。
　　结论:
　　脓毒症时肺脏组织的线粒体受到损伤，在12h损伤程度最严重，持续后24h有所下降，在72h损伤程度又明显有增加，且脓毒症时肺脏组织线粒体的HMGB1表达量和肺脏组织的线粒体的损伤严重程度高度相关。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1 研究背景

1．2 研究目的

1．3 研究内容

2 材料与方法

2．1 实验材料

2．2 实验方法

3 结果

3．1 各个时间点大鼠线粒体膜电位变化

3．2 HMGB1在大鼠肺脏线粒体的表达

3．3 大鼠肺脏线粒体HMGB1 DNA电泳

3．4 大鼠肺脏线粒体线粒体损伤程度和大鼠肺脏线粒体HMGB1表达量的关系

4 讨论

4．1 大鼠线粒体内HMGB1表达与脓毒症密切相关

4．2 线粒体功能损伤和脓毒症之间的关系

4．3 炎性因子HMGB1在线粒体的表达与脓毒症大鼠肺脏线粒体损伤程度有着高度的相关性

5 小结

参考文献

文献综述

致谢

附录一：英文缩写中文对照

附录二：读硕士期间的科研情况