湿地松、火炬松和黑松的组培繁殖技术研究

摘要

湿地松和火炬松具有许多优良性状,然而,松针褐斑病的大面积流行制约了其在中国南方的发展;黑松作为优良的园林绿化和造林树种,在日本深受欢迎,但却受到松材线虫病的严重危害.目前,通过抗病选育的方式选出了一批优良的湿地松、火炬松和黑松家系并建立了种子园,但抗病种子产量有限,不能满足生产需要,因此,利用组织培养方式快速扩大繁殖现有的抗性材料具有重要的意义.(1)以成熟胚为外植体诱导不定芽发生建立了湿地松组织培养再生体系.用含高浓度6-BA的液体培养基处理湿地松成熟胚12~36小时,吸干后转移到无激素的培养基上,一个月后即可诱导产生不定芽.经60 mgm 6-BA的液体培养基处理12~24小时后,不定芽诱导频率及平均每外植体产芽数达到最高,但芽体较小,在继代培养基中伸长较慢.经30mg/L 6-BA的液体培养基处理12-36小时后,不定芽诱导频率较低,但不定芽较健壮,在继代培养基中伸长较快.6-BA浓度大于80mg/L时不利于外植体生长及不定芽的分化.伸长的不定芽在改良1/2GD+NAA0.05mg/L的培养基中培养4周后可形成不定根.(2)以带子叶顶芽为外植体诱导丛生芽建立了湿地松组织培养的再生体系.诱导培养基中单独添加细胞分裂素即可诱导湿地松丛生芽的发生,6-BA效果优于KT;培养基中配合使用生长素较单独使用细胞分裂素效果更理想.基本培养基、6-BA及NAA的浓度、处理时间等对丛生芽诱导有较大影响.在改良GD+6-BA4~5 mg/L+NAA0.05~0.1 mg/L的培养基上培养4~5周,其丛生芽诱导率最高达95％;已分化的丛生芽继代在无激素或添加活性炭或生长素(NAA或IBA)的GD培养基中伸长较快;丛生芽单个切下继代培养在改良GD+6-BA3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L的培养基上增殖较快.将嫩梢切下置于附加NAA0.05mg/L或IBA2.0 mgm或NAA0.05 mg/L+IBA2.0 mg/L的1/2GD培养基中培养30天后均可形成不定根,生根率分别为53.3％、51.6％、64.7％.再生植株移栽成活率达85％.(3)采用带子叶顶芽为外植体建立了黑松、火炬松组织培养的再生体系.较适合黑松丛生芽诱导的培养基为改良GD+6-BA4~5 mgm+NAA0.1 mg/L,诱导率在90％左右.火炬松在改良GD+6-BA4 mg/L+NAA0.02 mgm的培养基中诱导率较高(86.7％).改良GD培养基中添加活性炭或微量生长素明显促进火炬松的伸长,对黑松丛生芽则无促进作用.较适合黑松丛生芽伸长的培养基为无激素的改良GD培养基,但其伸长速率比火炬松、湿地松低.将黑松、火炬松嫩梢切下置于附加NAA0.05 mgm的1/2GD培养基中培养30天后均可形成不定根,但生根率很低,分别为5％、12.5％.

目录

文摘

英文文摘

致谢

第一章湿地松、火炬松和黑松抗病育种研究进展

1湿地松、火炬松抗松针褐斑病选择育种研究进展

1.1松针褐斑病发生概况

1.2湿地松和火炬松抗松针褐斑病选择育种研究进展

2马尾松、黑松和赤松抗松材线虫病育种研究进展

2.1松材线虫病发生概况

2.2抗松材线虫病育种研究进展

3结语

参考文献

第二章松属树种组织培养研究概况

1松属树种组织培养研究进展

1.1国外研究概况

1.2国内研究概况

2影响松属树种组织培养植株再生的因素

2.1影响松属树种组织培养器官发生的因素

2.2影响松属树种体细胞胚胎发生的因素

3结语

参考文献

第三章湿地松成熟胚直接器官发生及植株再生

1材料和方法

1.1供试湿地松种子

1.2湿地松成熟胚不定芽的诱导

1.3湿地松不定芽的伸长与生根

1.4培养条件

2结果与分析

2.1外植体处理方式对湿地松不定芽诱导的影响

2.2基本培养基使用浓度对湿地松不定芽分化的影响

2.3不同6-BA浓度及浸泡处理时间对湿地松不定芽诱导的影响

2.4激素对湿地松不定芽伸长的影响

2.5湿地松不定芽的生根诱导及再生植株的移栽

3讨论

参考文献

第四章湿地松带子叶顶芽的丛生芽诱导及增殖研究

1材料和方法

1.1试验材料的来源及处理

1.2湿地松丛生芽的诱导及增殖

1.3湿地松丛生芽的伸长

1.4培养条件

2结果与分析

2.1外植体来源对湿地松丛生芽诱导的影响

2.2不同龄期的外植体对湿地松丛生芽诱导的影响

2.3不同基本培养基对湿地松丛生芽诱导的影响

2.4激素对湿地松丛生芽诱导的影响

2.5温度及对湿地松丛生芽诱导的影响

2.6 pH对湿地松丛生芽诱导的影响

2.7湿地松丛生芽的增殖

2.8湿地松丛生芽的伸长

3讨论

3.1影响湿地松丛生芽诱导的因素

3.2影响湿地松丛生芽伸长的因素

3.3湿地松丛生芽的大量增殖

参考文献

第五章湿地松丛生芽的生根及再生植株移栽技术研究

1材料和方法

1.1供试材料

1.2湿地松丛生芽生根

1.3再生植株的移栽

2结果与分析

2.1生长素种类与浓度对湿地松丛生芽生根的影响

2.2基本培养基与NAA对湿地松丛生芽生根的影响

2.3伸长培养基对湿地松丛生芽生根的影响

2.4活性炭对湿地松不定根诱导的影响

2.5不定根的伸长

2.6影响再生植株移栽成活的因素

3讨论

参考文献

第六章火炬松带子叶顶芽丛生芽诱导及植株再生

1材料和方法

1.1供试材料及处理

1.2火炬松丛生芽的诱导与分化

1.3火炬松丛生芽的伸长

1.4火炬松丛生芽不定根的诱导

1.5培养条件

2结果与分析

2.1火炬松丛生芽的诱导

2.2火炬松丛生芽的伸长

2.3火炬松丛生芽不定根的诱导

3 讨论

参考文献

第七章黑松带子叶顶芽丛生芽诱导及植株再生

1材料和方法

1.1供试材料及处理

1.2黑松丛生芽的诱导与分化

1.3黑松丛生芽的伸长

1.4黑松丛生芽不定根的诱导

1.5培养条件

2结果与分析

2.1黑松丛生芽的诱导

2.2黑松丛生芽的伸长

2.3黑松丛生芽的增殖

2.4黑松丛生芽的生根及移栽

3讨论

参考文献

第八章全文总结与讨论

1.主要结论

2.讨论和展望