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人血管内皮细胞氚水暴露后差异表达基因的筛选及毒性效应研究ICOSL/ICOS调控HSCs活化相关信号通路介导日本血吸虫感染小鼠肝纤维化的分子机制

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摘要

研究背景

一、日本血吸虫感染小鼠肝星状细胞的分离、鉴定和培养

(一)试剂与材料

1.主要试剂与耗材

2.仪器

(二)实验方法

1.动物模型的建立

2.肝星状细胞的分离

3.肝星状细胞的鉴定

4.肝星状细胞的培养

(三)实验结果

1.日本血吸虫尾蚴性别鉴定

2.日本血吸虫感染小鼠原代HSCs分离的得率及存活率

3.倒置荧光显微镜观察细胞的自发荧光

4.神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色

5.小鼠原代HSCs的形态观察

(四)讨论

参考文献

二、日本血吸虫感染小鼠HSCs中促纤维化分子基因表达水平及与活化增殖相关信号通路分子基因的动态表达

(一)试剂与材料

1.主要试剂与耗材

2.仪器

(二)实验方法

1.动物模型的建立

2.HSCs的分离

3.RNA的抽提

4.RNA逆转录

5.实时荧光定量PCR反应

6.统计学分析

(三)实验结果

1.小鼠原代HSCs RNA完整性鉴定

2.日本血吸虫感染C57BL/6J小鼠不同病期原代HSCs中促纤维化分子基因的动态表达

3.日本血吸虫感染C57BL/6J小鼠不同病期原代HSCs中与其活化相关信号通路分子基因的动态表达

(四)讨论

参考文献

三、共刺激信号ICOSL/ICOS对HSCs中促纤维化分子基因表达水平及与活化增殖相关信号通路分子基因的影响

(一)试剂与材料

1.主要试剂与耗材

2.仪器

(二)实验方法

1.ICOSL-KO小鼠的引进、筛选及培育

2.动物模型的建立

3.HSCs的分离

4.RNA的抽提、逆转录及实时荧光定量PCR反应

5.统计学分析

(三)实验结果

1.ICOSL-/-、WT小鼠基因型鉴定

2.日本血吸虫感染ICOSL-KO/C57BL/6J小鼠不同病期原代HSCs中促纤维化分子基因的动态表达

3.日本血吸虫感染ICOSL-KO/C57BL/6J小鼠不同病期原代HSCs中与其活化相关信号通路分子基因的动态表达

(四)讨论

参考文献

结论

英文缩写词表

综述 IL-21在感染免疫调节中的研究进展

硕士学习期间参与发表的论文

基金项目

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