氨基胍改善甲基乙二醛诱导的SK-N-SH细胞中tau蛋白过度磷酸化

摘要

研究背景：在许多有活性的羰基化合物和糖化终末产物（AGEs）的前体中，甲基乙二醛（MG）可能对细胞内的AGEs的形成起着关键作用。以前的研究已经报道AGEs与阿尔茨海默病（AD）的发病机制有关，即与由异常磷酸化的tau 聚合而成的神经原纤维缠结（NFTs）的形成有关。研究报道AD 患者体内的MG 水平是正常人体内的两倍，而其在脑脊液的浓度是血浆中的五到七倍。MG的特异清除酶——乙二醛酶I（Glyoxalase I）的表达在AD的早期阶段有减少，而在AD的中末期有增加。另外有研究证明乙二醛酶I在tau的转基因小鼠P301L中有明显的升高，这表明MG与tau 之间有联系。而细胞内的AGEs与PHF-tau 共定位，AGEs和糖化的tau 蛋白培养可以诱导氧化应激并最终导致神经功能障碍和细胞死亡，暗示了AGEs和tau 之间有某种内在联系。我们推测，MG 作为AGEs 重要的高活性的前体，可能是AD的tau 病理性改变重要的上游致病因素之一。因此，探明其在tau 蛋白异常磷酸化中的机制，对进一步理解AD和寻找新的防治途径具有重要意义。
　　 目的：探讨MG 对tau 蛋白磷酸化的影响及其作用机制。
　　 方法：用不同浓度的MG 处理SK-N-SH细胞不同时间，观察在不影响细胞活性的MG浓度和处理时间的条件下，通过western blotting和免疫荧光等方法检测经MG 处理后的细胞，tau 蛋白磷酸化变化模式，并探讨tau 磷酸化相关的蛋白激酶和磷酸酶活性及其在tau 磷酸化中的作用；使用相关激酶的抑制剂和氨基胍阐明MG 影响tau 蛋白异常磷酸化的可能机制。
　　 结果：
　　 1.用不同浓度的MG 处理SK-N-SH细胞1 小时，或者用1.0 mM 浓度的MG 处理细胞不同时间，发现用少于5mM的MG 处理细胞1 小时或者用1 mM的MG 处理细胞时间低于4 小时对细胞的活性无明显影响。
　　 2.用不同浓度的MG分别处理细胞1 小时，或者用1.0 mM 浓度的MG 处理细胞不同小时，可以观察到MG 能够诱导tau在许多不同位点磷酸化。
　　 3.GSK-3β和p38在MG 诱导的tau 异常磷酸化中激活。
　　 4.JNK，Erk1/2，cdk5在MG 诱导的tau 异常磷酸化中不起作用。
　　 5.PP2A的活性在MG 诱导的tau 异常磷酸化中未改变。
　　 6.使用GSK-3β和p38的抑制剂能够减弱MG 诱导的tau的异常磷酸化。
　　 7.使用氨基胍（AG）处理细胞，能够改善MG 引起的tau的异常磷酸化。
　　 结论：MG 能够引起SK-N-SH细胞中tau 蛋白的磷酸化，这可能是通过调节GSK-3β和p38，而氨基胍可以逆转tau 蛋白的磷酸化。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:主要英文缩略词表

声明

前 言

材料与方法

结 果

讨 论

小结、创新点、待研究的问题

参考文献

综述糖化终末产物（AGEs）与阿尔茨海默病

致谢

附录 攻读硕士学位期间发表论文及获奖情况