不同肌肉特异性启动子IGF2表达载体构建及对牛骨骼肌卫星细胞增殖的影响

摘要

旨在获得带有高效特异性启动子的IGF2表达载体,研究其对牛骨骼肌卫星细胞增殖的影响.本研究将构建的3种含有IGF2肌肉特异性启动子的真核表达载体转染牛骨骼肌卫星细胞和胎儿成纤维细胞,RT PCR检测IGF2的相对表达量,从而筛选高效特异性的载体,并进行EdU试验及细胞周期相关基因RT PCR检测.结果,成功构建了不同启动子desminpro、CMV-MyoGpro和MyoGpro double表达IGF2的载体.RT-PCR检测结果表明,pGL3-desminpro-IGF2是较高效的并具有特异性的载体.载体转染体外培养细胞提高了细胞增殖速度,并上调了细胞周期相关基因CDK6和IGF2的表达.这为转基因肉牛的生产奠定了重要基础.