鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白抗原表位多肽的预测、鉴定及免疫效果的初步研究

摘要

旨在对鸡传染性支气管炎病毒(IBV) H120株S1蛋白的B细胞及T细胞可能的表位进行预测并合成相应的多肽,然后免疫小鼠,并分析其免疫效果,以验证候选表位多肽的免疫原性.利用表位预测软件筛选并化学合成针对IBV H120株S1蛋白的5条表位多肽,然后免疫小鼠,通过间接ELISA、中和试验和流式细胞技术检测各表位多肽诱导的特异性抗体、中和抗体和外周血T细胞亚群.ELISA检测结果显示,5条表位多肽均具有良好的反应原性,免疫小鼠的血清效价高低顺序依次为Pep76-106＞ Pep240-257＞ Pep511-537＞Pep403-421＞ Pep135-172;中和试验结果表明,5条多肽免疫小鼠的血清中和滴度均高于空白对照组,其高低顺序依次为Pep240-257=Pep403-421=Pep511-537＞Pep76-106=Pep135-172;流式检测结果表明,5条多肽免疫小鼠在CD3+、CD4+ CD8-、CD8+ CD4-T淋巴细胞水平上均极显著高于空白对照组(P＜0.01),CD3+T及CD4+ CD8-T淋巴细胞数大小顺序依次为Pep403-421＞Pep240-257＞Pep76-106＞Pep511-537＞Pep135-172,CD8+ CD4-T淋巴细胞数大小顺序依次为Pep403-421＞Pep76-106＞Pep511-537＞Pep240-257＞Pep135-172.合成的5条表位多肽中,Pep240-257、Pep76-106和Pep403-421可以诱导体液免疫,Pep403-421可以诱导细胞免疫,其中,Pep403-421可以同时诱导细胞免疫及体液免疫.本研究结果为深入了解S1蛋白的免疫学特性以及研发诊断试剂和有效表位疫苗奠定了基础.