三聚氰胺诱导大鼠肾损害机制的研究

摘要

目的探讨三聚氰胺（melamine,Mel）诱导大鼠肾脏损伤的机制。方法雄性SD大鼠48只随机分为4组,每组12只。A组为空白对照组,喂标准颗粒饲料和饮用自来水;B组为结石诱导组,喂含3%Mel的颗粒饲料和饮用自来水;C组喂食含3%Mel的颗粒饲料和饮用含2%牛磺酸的水;D组喂标准颗粒饲料和饮用含2%牛磺酸的水。共喂养3个月。每周收集大鼠24 h尿液检测pH、肌酐、尿酸、蛋白、8-IP、H2O2和Mel水平。第3个月末处死全部大鼠,采血检测肌酐,进行肾脏病理分析（HE和Oil Red O染色）及线粒体分离和检测。结果 A组和D组尿液中未检测出Mel,B组和C组第1～4周尿液中Mel浓度分别为（3.16±0.45）、（4.39±0.21）、（5.40±0.28）、（5.50±3.26）mg/ml和（3.52±0.49）、（4.32±0.13）、（5.34±0.40）、（5.46±2.99）mg/ml,与A组比较,B组和C组尿液Mel浓度有药物暴露时间依赖性。A组尿蛋白、尿肌酐、肌酐清除率、肾脏/体质量比值分别为（6.45±1.45）mg/24 h、（28.0±7.4）mmol/L、（0.56±0.03）ml·min(-10·100g-1、（2.29±0.89）mg/g,B组和C组分别为（14.56±7.69）mg/24 h、（56.8±5.2）mmol/L、（0.29±0.05）ml·min-1·100g-1、（4.16±0.27）mg/g和（16.44±6.29）mg/24 h、（55.8±7.4）mmol/L、（0.30±0.07）ml·min-1·100g-1、（4.40±0.56）mg/g,与A组比较,B组和C组尿蛋白显著增多,尿肌酐减少,肌酐清除率降低,肾脏/体质量比值增加。与B组比较,C组肾功能无明显变化,血清肌酐,尿蛋白降低不明显,差异无统计学意义（P＞0.05）。B组和C组尿H2O2、8-IP及线粒体氧化检测试剂SOD、GSH-PX值分别为（28.5±5.2）mmol/L、（3.26±1.6）pg/ml、（21.1±7.8）U/mg prot、（19.0±2.5）活力单位和（26.7±4.8）mmol/L、（2.99±8.5）pg/ml、（20.3±6.9）U/mg prot、（17.9±4.8）活力单位,B组和C组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。病理分析可见Mel晶体主要集中在肾小管腔内（B组和C组）,肾脏间质损伤明显,并随着药物暴露时间的增加肾脏炎症和纤维化进行性发展。结论 Mel可诱导大鼠肾脏损害和结石形成,结石主要集中在内髓区肾小管位置,Mel不是通过氧化应激途径致肾脏损伤的。