脂肪干细胞复合膀胱脱细胞基质促进膀胱再生的实验研究

摘要

目的探讨脂肪干细胞（adipose-derived stem cell,ADSC）在兔的组织工程膀胱重建中的应用。方法采用自体脂肪干细胞和膀胱脱细胞基质（bladder acellular matrix graft,BAMG）构建兔组织工程膀胱。应用酶消化法分离培养兔自体的ADSC,并进行流式细胞鉴定。对新鲜的兔膀胱组织进行脱细胞处理制得BAMG。将ADSC扩增后接种于BAMG表面并进行体外培养,获得组织工程膀胱。对24只雄性新西兰兔行40%～50%膀胱部分切除,分为实验组和对照组,每组12只。实验组采用自体培养的ADSC构建的组织工程膀胱对缺损膀胱进行修复,对照组采用单纯的BAMG进行修复。术后24周进行膀胱造影并取材观察组织修复再生情况。结果镜下观察ADSC贴壁后绝大多数为纺锤形,细胞之间以细丝拉网。流式细胞仪检测结果 CD90、CD44、CD105、CD166、CD34表达均为阳性,CD106、CD45表达为阴性。ADSC种植于BAMG表面生长良好。修补24周后,对照组和实验组膀胱容量分别为术前的（69.33±5.05）%和（94.68±3.31）%。组织染色分析对照组显示上皮层正常,黏膜下纤维组织增生而肌层较薄;实验组则显示了与自体膀胱相似的正常的3层组织结构。结论采用ADSC和BAMG构建组织工程膀胱是理想的膀胱替代修补材料。