斑马鱼卵子中母源性补体成分的检测及溶菌活性研究

摘要

本研究首次检测到斑马鱼(Danio rerio)受精卵中存在母源性补体成分C3和Bf.在斑马鱼卵子胞浆中加入适量C3(所有补体激活途径的关键因子)抗体使补体C3沉淀失活,或将卵子胞浆45℃水浴30min(热灭活补体),均可显著降低卵子胞浆的抑菌率,说明斑马鱼卵子胞浆中的补体系统具有免疫活性.在此基础上,通过补体激活途径的抑制实验研究了母源性补体的作用方式.向斑马鱼卵子胞浆中分别加入适量C1q(经典途径关键成分)抗体和C4(同时参与经典途径和凝集素途径)抗体对其抑菌率无显著影响,而加入Bf(替代途径关键成分)抗体却能够显著降低卵子胞浆的抑菌率.另外,在斑马鱼卵子胞浆中加入EGTA螯合Ca2+抑制经典途径和凝集素途径,卵子胞浆的抑菌率并无明显变化,而加入EDTA同时螯合Ca2+和Mg2+使替代途径也受到抑制后,溶菌率则显著降低.补体途径抑制实验证明,斑马鱼早期胚胎中的补体成分主要是通过替代途径发挥作用.