Sox9基因转染诱导L6大鼠成肌细胞向软骨细胞表型分化的研究

摘要

利用脂质体转染法,将真核表达质粒pcDNA3.1-Sox9导入L6细胞中.通过细胞增殖检测、细胞形态学观察、标志基因表达分析和甲苯胺蓝染色等方法分析Sox9基因转染对L6细胞增殖和向成软骨方向分化的诱导作用.结果表明,Sox9基因转染对L6细胞的增殖能力没有影响,但能明显抑制L6细胞相互融合形成肌管.和对照相比,Sox9基因转染后,细胞成肌分化标志基因Myf5的表达受到明显抑制,而成软骨分化标志基因Ⅱ型胶原(typeⅡcollagen,Col2a1)和蛋白聚糖(Aggrecan,Agg)的表达显著提高.转染后14 d,Sox9基因转染的细胞可见甲苯胺蓝染色阳性的软骨细胞样结节,而对照组则鲜见类似结构.上述结果表明,Sox9基因转染可以抑制L6细胞向成熟肌细胞分化,并促进其向软骨表型分化.