盐藻中耐盐碳酸酐酶Dca的纯化及其消光系数测定

摘要

本研究将碳酸酐酶Dca片段插入原核表达载体pET21b中并转化大肠杆菌OrigamiB(DE3)pLysS,由IPTG诱导表达带有组氨酸标签的融合蛋白,并经镍柱亲和层析方法获得纯化的Dca,通过p-Nitrophenyl Acetate测活(pNPA)结果显示具有活性,为Dca结构与功能的研究提供了足量的蛋白质保证.纯化出的蛋白质利用Edelhoch方法测定其摩尔消光系数(molar absorbance coefficient)e,结果显示比预测的摩尔消光系数值偏小.