双重相对定量SD-qPCR在快速诊断性染色体变异中的应用

摘要

目的建立一种可进行双重相对定量的基于重复序列的荧光定量聚合酶链反应(SD-qPCR)方法,实现单管同时检测X和Y染色体数目。方法建立双重相对定量SD-qPCR检测体系,并将其用于197例羊水样本的检测。根据重复序列间的相对定量2-ΔΔCt值来判断样本X和Y染色体的数目,将检测结果与染色体核型分析结果进行比较。结果筛选出了2对重复序列分子标记,分别定位于16号染色体、X染色体和1号染色体、Y染色体;197例羊水样本中,性染色体数目正常样本185例;45,X样本5例;47,XXX样本3例;47,XXY样本2例;47,XYY样本2例。双重相对定量SD-qPCR检测结果与染色体核型分析结果一致。结论建立的双重相对定量SD-qPCR方法可实现单管同时检测X和Y染色体的数目,具有检测位点多、检测结果稳定的特点,可在临床推广使用。