SHV-12型超广谱β-内酰胺酶特性的研究

摘要

目的研究SHV-12型超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的特性.方法将blaSHV-12基因连接至pET28a载体上,并用重组质粒转化大肠埃希菌BL21进行克隆表达,挑选blaSHV-12阳性表达的菌落,提取其酶蛋白进行等电点测定和酶动力学分析.结果SHV-12型ESBL等电点为8.2.同时,在所测的几种抗生素中,该酶对头孢他啶和头孢噻肟的Km相同且最小;对头孢噻吩,有着最大的Vmax/Km;而对阿莫西林,表现出最大的Km和最低的Vmax.结论SHV-12型ESBL对头孢他啶和头孢噻肟具有高的亲和力,而对头孢噻吩有最大的催化效能.