摘要:以自交亲和性的沙糖橘(Citrus reticulata Blancocv.Shatangju)成熟雌蕊为检测子(Tester),自交不亲和性的芽变突变体-无籽沙糖橘成熟雌蕊为驱动子(Driver),构建了抑制性消减杂交(suppression-subtractivehybridization.SSH)cDNA文库。菌落PCR共筛选出949个阳性克隆,片段大小在200-700 bp之间;反向Northern blot进一步筛选,发现其中158个差异克隆在沙糖橘中呈显著上调表达。差异克隆经测序和序列分析,获得了一些自交亲和相关的基因,如SI—RNase、ubiquitin-E1、ubiquitin、zinc-finger protein、phosphatase、molecular chapemnes、Ca2+ binding protein和senescence-related genes等。利用半定量RT—PCR和Real-time PCR分析了其中的5个自交亲和相关基因的表达特异性,结果表明S1-RNase和ubiquitin-E1分别在沙糖橘的子房和花药中旱明显上调表达,约为无籽沙糖橘子房和花药表达量的60倩和7倍;zinc-fingerprotein和ubiqui-tin分别在沙糖橘叶片和芽呈明显上调表达;phosphatase在沙糖橘花丝和花药中的表达量约为无籽沙糖橘花丝和花药的3倍和4倍。沙糖橘自交亲和性是一个多基因协作的复杂过程,SI—RNase和ubiquitin-E1有可能在沙糖橘自交亲和反应中起列重要作用。