基于原核密码子偏好性构建高表达IGF-1基因的工程菌

摘要

基于原核密码子偏好性构建高表达IGF-1基因的工程菌。本发明依据原核密码子使用频率表，人工合成不同偏好全基因序列和人源原基因序列，并克隆在不同表达载体上，然后转化到不同表达大肠杆菌菌株中，共构建27株工程菌。PCR筛选阳性克隆、IPTG诱导表达、SDS-Page电泳和HPLC检测，筛选获得了一株经偏好性改造能高效表达融合蛋白的工程菌株，该工程菌株命名为RPP②，经液相检测RPP②目的蛋白的表达量是所构建的未经改造人源原基因工程菌最高表达量的2.4倍，若该菌用于工业化生产，能极大提高工业产值并为企业带来显著经济效益。