定量RT-PCR

摘要： 目的 观察联合检测尿液miR-128a和miR-28-3p水平在前列腺癌诊断和预后中的价值.方法 选择2013年1月至2016年12月确诊的前列腺癌患者尿液标本117例,为前列腺癌组.选择同期诊断为前列腺良性增生(75例)和健康体检者(30例)的尿液标本,分别为前列腺良性增生组和健康对照组.采用定量RT-PCR的方法 检测3组尿液miR-128a和miR-28-3p的表达.观察3组尿液中miR-128a和miR-28-3p表达水平,比较术前术后前列腺癌表达水平的变化,与临床病理因素和预后的关系,及其在诊断和判断预后的诊断效能.结果 前列腺癌组尿液miR-128a表达水平明显高于前列腺良性增生组和健康对照组(P0.05).随访2年,死亡组的尿miR-128a表达水平明显高于存活组(P0.05).结论 MiR-128a和miR-28-3p参与了前列腺癌的发生发展,在诊断前列腺癌和判断预后具有重要临床价值.

摘要： 目的 观察血清miRNA-128a和miRNA-128b表达在胃癌早期诊断和预后的影响.方法 选择2015年1月至2017年1月在复旦大学附属华山医院就诊且病理确诊的胃癌患者118例,设为胃癌组.选择同期在我院病理诊断为胃息肉者75例和健康体检者45例,分别为胃息肉组和健康对照组.用定量RT-PCR(qRT-PCR)法检测各组血清miRNA-128a和miRNA-128b表达水平.观察胃癌患者血清miRNA-128a和miRNA-128b表达水平与临床病理指标,及其诊断和预测2年内存活率的效能.结果 胃癌组血清miRNA-128a表达水平明显高于胃息肉组(q=26.388,P＜0.01)和健康对照组(q=32.195,P＜0.01),手术后较术前明显降低(t=14.321,P＜0.01),胃息肉组明显高于健康对照组(q=7.198,P＜0.01);而胃癌组血清miRNA-128b表达水平明显低于胃息肉组(q=211.148,P＜0.01)和健康对照组(q=249.984,P＜0.01),手术后较术前明显升高(t=15.139,P＜0.01),胃息肉组明显低于健康对照组(q=38.232,P＜0.01).血清miRNA128a和miRNA-128b表达水平对诊断胃癌具有较高的灵敏度和特异性,联合检测的灵敏度为78.8％,特异性为97.3％,曲线下面积明显高于单个指标miRNA-128a(Z=3.436,P＜0.01)和miRNA-128b(Z=2.658,P＜0.01).胃癌患者血清miRNA-128a和miRNA-128b表达水平与肿瘤细胞分化程度、TNM分期、淋巴结转移和浸润深度具有明显相关性(P＜0.01).病例随访2年,胃癌存活组血清miRNA-128a表达水平明显低于死亡组(P＜0.01);当其＞98.47 fmol/L,预测2年内出现死亡的灵敏度为89.5％,特异性为81.8％,曲线面积为0.889.而存活组的血清miRNA-128b表达水平明显高于死亡组(P＜0.01),当其≤94.86 fmol/L,预测2年内死亡的灵敏度为94.7％,特异性为81.8％,曲线下面积为0.931.结论 联合检测血清miRNA-128a和miRNA128b有助于胃癌诊断,对2年内出现死亡的预测具有重要参考价值.

摘要： 目的 探讨结直肠癌中miRNA-30c的表达与结直肠癌患者的临床病理及预后的相关性.方法 采用实时定量PCR方法检测200对结直肠癌组织和邻近正常组织的miRNA-30c的表达水平,并对其与临床特征和预后的关系进行了统计分析.结果 与正常的相邻组织相比,结直肠癌组织标本miRNA-30c的表达水平显著降低(P<0.001).miRNA-30c的表达与肿瘤大小(P=0.012)、TMN分期(P=0.002)和淋巴结转移(P=0.004)呈正相关.单因素分析显示,miRNA-30c表达低的患者总生存明显短于表达水平较高的患者(P<0.001).多因素分析显示miRNA-30c低表达可能是预后不良的独立预后因子(P<0.001).结论 miRNA-30c可以用于预测结直肠癌患者的预后,并对选择合理的治疗措施有一定帮助.

摘要： 黄烷酮-3-羟基转移酶(F3H)是植物黄酮合成途径上游的一个关键酶,它催化黄烷酮C3位羟化,形成二氢黄酮醇.构建长叶红砂RtF3H3基因酵母表达载体,为进一步研究RtF3H3基因功能奠定基础.基于高通量转录组测序结果,利用RT-PCR技术克隆获得长叶红砂F3H3(RtF3H3,GenBank登录号LC055546)基因,其开放阅读框长1 014 bp,编码338个氨基酸,推测蛋白分子量为38.46 kDa,理论等电点为5.7.通过定量RT-PCR研究发现,RtF3H3在茎中表达量较高,在根和叶中表达量较低.不同程度NaCl(100,300,500 mmol/L)和不同时间Uv(12,24,36 h)胁迫都能诱导RtF3H3基因表达量升高.另外,构建了RtF3 H3基因酵母表达载体,为进一步研究RtF3H3基因功能奠定基础.

摘要： 目的 检测肾透明细胞癌患者血清miR-362水平,探讨其作为肾透明细胞癌分子诊断指标的可能性.方法 采集107例肾透明细胞癌患者治疗前血清(其中TNM Ⅰ期76例、Ⅱ期16例、Ⅲ期2例、Ⅳ期8例及未知者5例),用实时荧光定量RT-PCR法检测各组miR-362含量,并以107例年龄、性别匹配的健康人作为对照组.结果 miR-362在肾透明细胞癌患者血清中的相对含量为0.81(0.65,1.15),与健康对照组0.62(0.46,0.78)相比,表达水平明显升高(U=3 122,P ＜0.01).Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅳ期患者血清miR-362的相对含量分别为0.76(0.66,0.95)、0.76(0.66,0.95)和0.69(0.37,1.03),均明显高于健康对照组,差异有统计学意义(U分别为2 197、474和98,P均＜0.01).miR-362诊断肾透明细胞癌的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.727(95％ CI:0.661 ～0.793).当cut off值为0.696时,miR-362诊断肾透明细胞癌的敏感性和特异性分别为64.5％和63.6％.进一步对TNM Ⅰ期患者进行分析,结果其AUCROC为0.715(95％ CI:0.641～0.790).当cut off值为0.696时,miR-362诊断TNM Ⅰ期患者的敏感性和特异性分别为65.3％和63.6％.结论 早期肾透明细胞癌患者血清中miR-362水平升高,具有一定的早期诊断潜能.

摘要： BackgroundThe 导致了 pluripotent 干细胞(iPSC ) 在心肌的梗塞(MI ) 的细胞的治疗显示出大潜力，当它的申请被 cardiomyocyte 区别的低效率妨碍时。现在的学习被设计从老鼠在 cardiomyocyte 区别上调查 cardiotrophin-1 ( CT-1 )的效果导致的 pluripotent 干细胞( miPSCs )和内在的机制 involved.MethodsThe 为从 miPSCs 的 cardiomyocyte 区别的最佳的治疗状况与理想的集中( 10 ng/mL )和持续时间被建立(从到白天的白天 3 14 ) CT-1 管理。说明了胚胎的 cardiogenesis 的心脏的特定的基因的起来调整的表示被量的 RT-PCR 观察。 α 的提高的数量；肌浆球蛋白重链( α ；-MHC)和心脏的 troponin 我( cTn 我)积极房间被 immunofluorescence 在显微镜的分析揭示了的 CT-1 group.ResultsTransmission 电子染色和流动 cytometry 分析检测与 CT-1 对待的房间更好出现了，这组织了 sacromeric 结构和更多线粒体，它是成熟 cardiomyocytes 的词法特征。当与控制 group.ConclusionsThese 相比调查结果建议 CT-1 能提高 cardiomyocyte 区别以及导致的 pluripotent 干细胞导出的老鼠的成熟，西方的污点证明 CT-1 经由 JAK2/STAT3/Pim-1 小径部分从 miPSCs 支持 cardiomyocyte 区别由调整 JAK2/STAT3/Pim-1signaling 的 cardiomyocytes 小径。

摘要： 以安徽地方品种圩猪、安庆六白猪以及国外瘦肉型品种长白猪为研究对象,采用高效液相色谱法测定3种猪背最长肌肌苷酸(IMP)含量.利用家畜或家禽中已鉴定的影响肉质性状的QTLs信息与猪的基因组比对,得到可能与猪肉质相关的目的基因:ADSL与GARS-AIRS-GART基因.定量PCR法比较影响肌苷酸含量的AD-SL与GARS-AIRS-GART基因mRNA在肝脏、心脏和背最长肌组织中的表达水平,并研究2种基因在不同猪种中的表达量与IMP含量的相关性.结果表明:长白猪的背最长肌肌苷酸含量高于圩猪和六白猪.ADSL mRNA在3种猪的表达模式均表现为背最长肌中最高,心脏次之,肝脏最低的趋势.而GARS-AIRS-GART mRNA的表达模式为背最长肌最高,肝脏次之,心脏最低的趋势.ADSL mRNA在长白猪肝脏的表达量,GARS-AIRS-GARTmRNA在圩猪肝脏和六白猪心脏的表达量均与IMP含量显著负相关.

摘要： 目的:检测人乳腺癌组织中SCARA5mRNA的表达情况及其在乳腺癌发生发展中的意义.方法:收集55例乳腺癌患者的乳腺癌组织及其配对癌旁正常乳腺组织,提取总RNA,采用SYBR Green1实时荧光定量RT-PCR技术检测SCARA5 mRNA表达情况.结果:在55例样本中,在45例患者中SCARA5mRNA的表达下调(81.82％),在10例患者中SCARA5mRNA的表达上调,其表达差异具有统计学意义(P＜0.05),但与临床病理因素差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:SCARA5基因在大部分乳腺癌组织中表达下调,其可能在乳腺癌的发生过程发挥重要作用.

摘要： 目的:检测人乳腺癌组织中SCARA5m RNA的表达情况及其在乳腺癌发生发展中的意义。方法:收集55例乳腺癌患者的乳腺癌组织及其配对癌旁正常乳腺组织,提取总RNA,采用SYBR Green1实时荧光定量RT-PCR技术检测SCARA5 m RNA表达情况。结果:在55例样本中,在45例患者中SCARA5m RNA的表达下调(81.82%),在10例患者中SCAR A5m RNA的表达上调,其表达差异具有统计学意义(P0.05),但与临床病理因素差异均无统计学意义(P0.05)。结论:SCARA5基因在大部分乳腺癌组织中表达下调,其可能在乳腺癌的发生过程发挥重要作用。

摘要： 运用PC基因mRNA与PC基因DNA相比缺少一个81 bp内含子序列的基本原理,应用PCR技术和生物工程原理,通过一对引物,进行一次克隆,成功构建了PC基因mRNA的466 bp竞争DNA模板重组质粒,PC基因mRNA与PC基因DNA可以互为内参照.为应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测糖代谢过程中PC基因mRNA水平奠定方法学基础.

摘要： 运用PC基因mRNA与PC基因DNA相比缺少一个81 bp内含子序列的基本原理,应用PCR技术和生物工程原理,通过一对引物,进行一次克隆,成功构建了PC基因mRNA的466 bp竞争DNA模板重组质粒,PC基因mRNA与PC基因DNA可以互为内参照.为应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测糖代谢过程中PC基因mRNA水平奠定方法学基础.

摘要： 运用PC基因mRNA与PC基因DNA相比缺少一个81 bp内含子序列的基本原理,应用PCR技术和生物工程原理,通过一对引物,进行一次克隆,成功构建了PC基因mRNA的466 bp竞争DNA模板重组质粒,PC基因mRNA与PC基因DNA可以互为内参照.为应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测糖代谢过程中PC基因mRNA水平奠定方法学基础.

摘要： 运用PC基因mRNA与PC基因DNA相比缺少一个81 bp内含子序列的基本原理,应用PCR技术和生物工程原理,通过一对引物,进行一次克隆,成功构建了PC基因mRNA的466 bp竞争DNA模板重组质粒,PC基因mRNA与PC基因DNA可以互为内参照.为应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测糖代谢过程中PC基因mRNA水平奠定方法学基础.

摘要： 运用PC基因mRNA与PC基因DNA相比缺少一个81 bp内含子序列的基本原理,应用PCR技术和生物工程原理,通过一对引物,进行一次克隆,成功构建了PC基因mRNA的466 bp竞争DNA模板重组质粒,PC基因mRNA与PC基因DNA可以互为内参照.为应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测糖代谢过程中PC基因mRNA水平奠定方法学基础.

摘要： 运用PC基因mRNA与PC基因DNA相比缺少一个81 bp内含子序列的基本原理,应用PCR技术和生物工程原理,通过一对引物,进行一次克隆,成功构建了PC基因mRNA的466 bp竞争DNA模板重组质粒,PC基因mRNA与PC基因DNA可以互为内参照.为应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测糖代谢过程中PC基因mRNA水平奠定方法学基础.

摘要： Wilm's瘤1型基因(WT1)是一种抑癌基因,研究发现绝大多数急性白血病(AL)尤其是急性髓系白血病(AML)细胞均高表达WT1,是一个白血病特征标志.为了评价定量WT1mRNA在监测AML微小残留病(MRD)的意义,本研究采用实时(Real-time)定量RT-PCR(RQ-PCR)技术分别测定了15名正常人骨髓及72名AML患者治疗前后123份骨髓标本WT1mRNA的水平,62份AML1-ETO(+)患者标本亦定量检测了AML1-ETO融合mRNA的水平,8例AML1-ETO(+)跟踪观察患者的50份标本同时监测了WT1及AML1-ETO水平变化.WT1及AML1-ETO基因表达水平用内参基因ABL归一化.我们选用1例AML1-ETO(+)初治AML患者cDNA作为标准,命名为ACTRL,该cDNA用水做10倍系列稀释,分别进行WT1、AML1-ETO及ABL的RQ-PCR,制作各自的标准曲线,标准品ACTRL的AML1-ETO/ABL及WT1/ABL的比值均为1.0,标本的比值含义为AML1-ETO或WT1基因的含量是标准ACTRL的倍数,分别反映了各份标本WT1及AML1-ETO的表达水平。

摘要： Wilm's瘤1型基因(WT1)是一种抑癌基因,研究发现绝大多数急性白血病(AL)尤其是急性髓系白血病(AML)细胞均高表达WT1,是一个白血病特征标志.为了评价定量WT1mRNA在监测AML微小残留病(MRD)的意义,本研究采用实时(Real-time)定量RT-PCR(RQ-PCR)技术分别测定了15名正常人骨髓及72名AML患者治疗前后123份骨髓标本WT1mRNA的水平,62份AML1-ETO(+)患者标本亦定量检测了AML1-ETO融合mRNA的水平,8例AML1-ETO(+)跟踪观察患者的50份标本同时监测了WT1及AML1-ETO水平变化.WT1及AML1-ETO基因表达水平用内参基因ABL归一化.我们选用1例AML1-ETO(+)初治AML患者cDNA作为标准,命名为ACTRL,该cDNA用水做10倍系列稀释,分别进行WT1、AML1-ETO及ABL的RQ-PCR,制作各自的标准曲线,标准品ACTRL的AML1-ETO/ABL及WT1/ABL的比值均为1.0,标本的比值含义为AML1-ETO或WT1基因的含量是标准ACTRL的倍数,分别反映了各份标本WT1及AML1-ETO的表达水平。

摘要： Wilm's瘤1型基因(WT1)是一种抑癌基因,研究发现绝大多数急性白血病(AL)尤其是急性髓系白血病(AML)细胞均高表达WT1,是一个白血病特征标志.为了评价定量WT1mRNA在监测AML微小残留病(MRD)的意义,本研究采用实时(Real-time)定量RT-PCR(RQ-PCR)技术分别测定了15名正常人骨髓及72名AML患者治疗前后123份骨髓标本WT1mRNA的水平,62份AML1-ETO(+)患者标本亦定量检测了AML1-ETO融合mRNA的水平,8例AML1-ETO(+)跟踪观察患者的50份标本同时监测了WT1及AML1-ETO水平变化.WT1及AML1-ETO基因表达水平用内参基因ABL归一化.我们选用1例AML1-ETO(+)初治AML患者cDNA作为标准,命名为ACTRL,该cDNA用水做10倍系列稀释,分别进行WT1、AML1-ETO及ABL的RQ-PCR,制作各自的标准曲线,标准品ACTRL的AML1-ETO/ABL及WT1/ABL的比值均为1.0,标本的比值含义为AML1-ETO或WT1基因的含量是标准ACTRL的倍数,分别反映了各份标本WT1及AML1-ETO的表达水平。

摘要： Wilm's瘤1型基因(WT1)是一种抑癌基因,研究发现绝大多数急性白血病(AL)尤其是急性髓系白血病(AML)细胞均高表达WT1,是一个白血病特征标志.为了评价定量WT1mRNA在监测AML微小残留病(MRD)的意义,本研究采用实时(Real-time)定量RT-PCR(RQ-PCR)技术分别测定了15名正常人骨髓及72名AML患者治疗前后123份骨髓标本WT1mRNA的水平,62份AML1-ETO(+)患者标本亦定量检测了AML1-ETO融合mRNA的水平,8例AML1-ETO(+)跟踪观察患者的50份标本同时监测了WT1及AML1-ETO水平变化.WT1及AML1-ETO基因表达水平用内参基因ABL归一化.我们选用1例AML1-ETO(+)初治AML患者cDNA作为标准,命名为ACTRL,该cDNA用水做10倍系列稀释,分别进行WT1、AML1-ETO及ABL的RQ-PCR,制作各自的标准曲线,标准品ACTRL的AML1-ETO/ABL及WT1/ABL的比值均为1.0,标本的比值含义为AML1-ETO或WT1基因的含量是标准ACTRL的倍数,分别反映了各份标本WT1及AML1-ETO的表达水平。

摘要： 本发明涉及一种用多个光学单元(106、107)来监视在多个样本腔室(101-104)中的实时PCR反应的光学检测系统。由于光学单元相对于样本腔室的相对运动，可组合颜色多路复用和空间多路复用，以便在PCR的处理期间光学检测在样本中的病原体和输送定量结果。

摘要： 本发明提供一种能够让用户容易地理解所选择的X射线光学系的测量的X射线分析的操作导向系统、操作导向方法、以及操作导向程序。具备：定性分析结果取得单元，其取得试样中所含有的多个结晶相的信息；重量比计算单元，其基于多个结晶相中的、进行了对洛伦兹偏振因子的补正后的衍射强度之和、化学式量、化学式单位中所包含的原子各自所属的电子的个数的平方和，来对所述多个结晶相的重量比进行计算。

摘要： 本发明涉及一种用多个光学单元(106、107)来监视在多个样本腔室(101-104)中的实时PCR反应的光学检测系统。由于光学单元相对于样本腔室的相对运动，可组合颜色多路复用和空间多路复用，以便在PCR的处理期间光学检测在样本中的病原体和输送定量结果。

摘要： 提供对作为抑郁症的生物标志物的EAP浓度进行定量的新的定量方法、定量用的酶、定量用试剂盒以及定量用传感器。提供一种向含有磷酸乙醇胺的样品中添加氧化还原酶的磷酸乙醇胺的定量方法。可以通过添加所述氧化还原酶来还原介体，使还原后的所述介体与试剂反应，确定所述磷酸乙醇胺的浓度。或者，作为所述氧化还原酶，还可以使通过添加氧化酶而生成的过氧化氢与试剂反应，确定所述磷酸乙醇胺的浓度。

摘要： 本发明涉及氨的定量方法、定量试剂、定量试剂盒、测试片和氨定量装置。具体而言，本发明涉及一种氨的定量方法，所述方法包括：进行第一反应，其中含氨的测试液与三磷酸腺苷和L‑谷氨酸在谷氨酰胺合成酶的存在下反应以产生磷酸；进行第二反应，其中产生的磷酸与丙酮酸在丙酮酸氧化酶的存在下反应；和测定由所述第二反应消耗或产生的组分，以将氨定量，其中不进行由丙酮酸激酶介导的由二磷酸腺苷产生三磷酸腺苷的反应。

摘要： 一种定量配给装置，用于借助工作介质穿过定量配给开口(22a)向定量配给腔(24)中抽吸定量配给介质(26)和从该定量配给腔中分配定量配给介质，包括：至少部分地用可压缩的工作介质填充的工作腔(12)；压力改变装置(14，16)，所述压力改变装置设计成用于改变工作腔(12)中的工作介质的压力；和具有定量配给开口(22a)的定量配给腔(24)；其中，所述工作腔(12)和定量配给腔(24)经由一阀(28)连接，该阀能在阻断位置和导通位置之间切换，在所述阻断位置中阻止从工作腔(12)经由阀(28)到定量配给腔(24)中的压力传递、特别是工作介质流动，在所述导通位置中允许从工作腔(12)经由阀(28)到定量配给腔(24)中的压力传递。

摘要： 定量给料系统(10)，其对引入密炼机的腔室中的液体产物的定量给料的量进行质量控制。所述定量给料系统包括：至少一个储液器(12)，其储存液体产物；至少一个产物导管(16)，其将定量给料的量的液体产物从储液器(12)输送到密炼机；定量给料装置，其直接测量从储液器(12)定量给料并输送到密炼机的液体产物的质量和密度，所述定量给料装置包括至少一个泵(18)和质量流量计(20)，所述至少一个泵(18)布置于储液器的下游，所述质量流量计(20)布置于泵(18)的下游；混炼注入器(32)，其布置于定量给料装置的下游；以及压力传感器(24)，其布置于定量给料装置的下游，以检测包括产物导管、储液器、定量给料装置和混炼注入器的定量给料回路的压力。

摘要： 显示和描述了一种用于定量和/或制备待制备的溶剂，特别是婴儿食品，尤其是婴儿奶或婴儿粥类、咖啡和/或茶的装置(1；1')，该装置包括具有第一接收区(5；5')和第二接收区(7；7')的壳体(3)，其中第一接收区(5；5')被设计为接收用于待制备溶剂的第一成分的第一容器(9；9')，并且其中第二接收区(7。7')被设计成接收用于液体的第二容器(11)、用于控制液体温度的温度控制装置、用于对第一成分进行定量的定量装置(29；29')，其中第一接收区(5；5')包括用于接收定量装置(29；29')的定量装置接收区(27；27')，并且其中用于定量装置(29；29')的驱动和/或传动装置(39)被布置在定量装置接收区(27；27)。

摘要： 本发明提供一种晶相定量分析装置，能够更简便地进行包含多个晶相的样品的定量分析。该晶相定量分析装置包括：取得样品的粉末衍射图的单元；取得多个晶相的信息的单元；取得分别针对多个晶相的拟合函数的单元；使用这些拟合函数，对粉末衍射图执行全图拟合，取得其结果的单元；以及基于其结果计算多个晶相的重量比的单元，其中，各拟合函数从由第一拟合函数、第二拟合函数、第三拟合函数构成的组中选择，第一拟合函数使用通过全图分解得到的积分强度，第二拟合函数使用根据观察或计算的积分强度，第三拟合函数使用根据观察或计算的峰形强度。

摘要： 本申请属于电路板制造领域，本申请提供了一种液体定量盒及具有该液体定量盒的液体定量装置，液体定量盒包括具有容纳腔的盒体，盒体具有与容纳腔连通的进液口和排液口，容纳腔包括第一容纳腔和连通于第一容纳腔下端的第二容纳腔，所述第一容纳腔的最窄处连接于所述第二容纳腔的最宽处，且所述第一容纳腔的最窄处的宽度大于所述第二容纳腔的最宽处的宽度，第一容纳腔的容积大于第二容纳腔的容积，盒体设置有用于观察第一容纳腔和第二容纳腔内液面高度的透明观察窗。液体定量装置包括上述的液体定量盒、液面感应组件、进液组件和排液组件。本申请提供的一种液体定量盒及具有该液体定量盒的液体定量装置，具有实用性强且使用方便的特点。