温郁金

摘要： 目的建立测定温郁金药材醋制前后5种成分含量的高效液相色谱(HPLC)法。方法色谱柱为Waters Sunfire-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%冰醋酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为214 nm,柱温为30°C,进样量为10μL。结果莪术烯醇、莪术二酮、莪术醇、吉马酮、β-榄香烯的进样量分别在0.01989~0.31830μg(r=0.9995,n=5),0.12780~2.04600μg(r=0.9993,n=5),0.01905~0.30480μg(r=0.9997,n=5),0.06294~1.00700μg(r=0.9998,n=5),0.06468~1.03500μg(r=0.9995,n=5)范围内与峰面积线性关系良好;精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于1.5%;平均加样回收率分别为101.48%,98.27%,97.14%,103.41%,101.84%,RSD分别为1.75%,1.15%,1.03%,1.42%,1.00%(n=6);温郁金药材醋制后上述5种成分含量均减少。结论该方法简单、可行,重复性和稳定性良好,能有效评价温郁金药材的质量,可为温郁金药材资源可持续开发利用提供参考。

摘要： 目的:探讨温郁金对胃癌细胞的抑制作用及其对IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ表达的影响。方法:经超临界二氧化碳萃取法,提取温郁金挥发油成分,选择氟尿嘧啶(5-Fu)作为阳性对照物,采取MTT法,检测温郁金提取物对胃癌细胞的影响,通过放射免疫法观察IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ浓度变化。结果:(1)随着剂量增加,温郁金提取物1、2对胃癌细胞的抑制率呈增加趋势,具有统计学意义(P<0.05)。(2)提取物1、2的IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ含量明显低于对照组,差异存在统计学意义(P<0.05)。结论:温郁金提取物对胃癌细胞生长具有抑制作用,且抑制作用可能与IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ表达有关。

摘要： 温郁金为浙江省道地药材“浙八味”之一,含有抗癌药用成分β-榄香烯等.从温郁金块根上端0.1-0.2cm处剪取长1-1.5 cm的芽尖作为外植体,利用0.1％升汞消毒10 min,在丛生芽培养基MS+6-BA2 mg/L+IAA 1 mg/L+ZT 1 mg/L+Cef 500 mg/L上能高效获得丛生芽,芽的再生率可达100％.丛生芽经切割后置于生根培养基MS+6-BA 0.5 mg/L+ IAA 0.5 mg/L上形成带根的完整植株.此外,利用发根农杆菌K599侵染温郁金组培苗的茎段、块根和根茎段,均成功诱导出毛状根;其中,根茎段毛状根的诱导率可达75％.研究结果为快速大量繁殖和培育脱毒的温郁金以及利用毛状根工厂化生长温郁金药用成分提供了基础.

摘要： 海南省自1997年引进种植温郁金以来,温郁金病虫害流行愈发严重.本文针对近年来温郁金发生的主要病虫害进行田间调查和研究,提出科学防治方法及措施,以期为海南温郁金产业的可持续发展提供技术支持和参考借鉴.

摘要： [目的]通过试验寻找出优良的温郁金脱毒苗的制备方法及栽培方法.[方法]通过固定其中一个条件不变,改变其他因素,验证出较好的温郁金根状茎消毒方法,及其丛生芽的诱导、愈伤、继代、分化、生根培养方法.[结果]温郁金根状茎的消毒方法为流水冲洗30～50 min,再用70％乙醇和10％过氧化氢先后消毒20～40 s和6～8 min,然后用无菌水重新冲洗3～4次.丛生芽诱导培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L,愈伤、继代、分化、生根培养基分别为MS+2,4-D 2.0 mg/L+KT 5.0 mg/L、MS+2,4-D 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L、MS+KT 5.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L、MS+NAA 1.0 mg/L.[结论]通过对脱毒苗制备过程的条件控制,使温郁金脱毒苗品质较高以及脱毒率可以达到100％,另外提供科学的栽培方法,使所制备的脱毒苗栽培育苗后成活率达到100％,且幼苗健壮.

摘要： 目的 研究温郁金源3种中药气味差异.方法 通过电子鼻和顶空-气-质联用技术(HS-GC-MS)分析3种中药的气味及挥发性成分,采用双标图分析传感器响应值与挥发性化合物之间的联系.结果 雷达图显示3种中药的气味响应值不同,主成分分析和偏最小二乘判别分析均能较好区分3种中药;从温郁金、温莪术、片姜黄中分别鉴定出23、19、36种化合物,三者共有成分12种;PLS双标图显示传感器LY2/G、LY2/AA、LY2/LG、LY2/gCT、P40/1与烯烃类、酮类成分具有相关性.结论 电子鼻可快速区分温郁金源3种中药,结合顶空-气-质联用技术为温郁金源中药的电子鼻响应物质基础研究提供实验依据.

摘要： 中医认为肿瘤病机与"痰""毒""瘀""虚"关系密切,治疗肿瘤应遵循"抗癌解毒"以治毒;调和气血、疏肝散积以治瘀;祛邪扶正以治虚.榄香烯(Elemene)是从传统中药姜科植物温郁金中提取的萜烯类化合物,郁金入组方常用宫颈癌、卵巢癌等妇科肿瘤治疗,中医机理为散结化血以除瘀.临床研究证实,榄香烯在治疗恶性胸腹腔积液、多种实体瘤、脑转移瘤等方面发挥重要疗效.进一步研究证实,榄香烯抑制肿瘤的发生和发展是一个多途径、多通路、多靶点的过程.榄香烯乳注射液在发挥抗肿瘤作用的同时,联合放化疗有协同作用,治疗效果显著增高,也能有效缓解癌性疼痛,提高机体免疫能力,降低单用化疗药物引起的不良反应发生率,显著提高肿瘤患者生活质量.现就榄香烯乳注射液在临床应用现状及进展进行综述,以期为临床合理应用榄香烯乳注射液提供参考,并推动其相关研究.

摘要： 目的考察温郁金不同加工方法对姜黄素类成分含量的影响。方法将温郁金趁鲜切片加工,以红外干燥法、微波干燥法以及不同温度烘干法等不同方式干燥。分别选用不同溶剂,使用不同的提取方法对姜黄素类成分的提取工艺进行考察,确定最佳溶剂、最佳的提取方法。应用选取的最佳工艺,对不同加工方法的温郁金中姜黄素进行提取,进行含量测定,比较测定结果,确定最佳的产地加工方法。

摘要： [目的]比较2种不同的提取方法对温郁金挥发油的产率及成分的影响.[方法]分别采用共水蒸馏法和乙醚提取法提取温郁金挥发油,采用GC-MS联用技术分离鉴定挥发油成分,面积归一化法确定各成分的相对含量.[结果]共水蒸馏法出油率为2.91％,乙醚提取法出油率为1.68％.从共水蒸馏法和乙醚提取法挥发油中分别鉴定出46和40种成分,共水蒸馏法所提挥发油主要成分为莪术烯、β-榄香烯酮、5-羟基-3-甲基-1-茚酮等,乙醚提取法所提挥发油主要成分有β-榄香烯、(+)-香橙烯、异龙脑等.[结论]2种方法以共水蒸馏法产率更高,乙醚提取法挥发油色泽更佳;2种方法中挥发油成分的主要类型均为萜类,其中乙醚提取法萜类含量更高,达到85％,其共有成分为20种,主要为β-榄香烯、异龙脑、β-榄香烯酮、桉油烯醇、β-瑟林烯、吉马酮等,但在含量上有一定差异,为温郁金挥发油的质量控制提供一定依据.

摘要： 目的:观察温郁金对胃癌细胞抑制作用和MMP-2和CD44v6蛋白表达的影响,探讨其抗胃癌细胞转移的作用机制.方法:以SGC-7901胃癌细胞株建立胃癌裸鼠原位移植瘤模型,将裸鼠随机分为对照组(0.9％氯化钠溶液)及实验组(温郁金水煎剂).观察裸小鼠胃癌种植后肿瘤生长及转移灶情况,用免疫组化法检测两组肿瘤组织中MMP-2和CD44v6蛋白的表达.结果:两组荷瘤鼠胃壁均有肿瘤生长,荷瘤率100％,对照组瘤重4.09±1.17g,实验组瘤重2.73±0.92g(与对照组比较P＜0.05),抑瘤率为33.25％;实验组肝、腹腔和淋巴结转移比生理盐水对照组明显减少(P＜0.05);实验组瘤体中MMP-2和CD44v6的表达明显下调.结论:温郁金具有抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的作用,其作用机制可能与下调MMP-2和CD44v6的表达有关.

摘要： 目的:通过对传统温郁金与组培温郁金的对比研究,比较两者在药材质量上的差异.方法:从性状特征、薄层色谱鉴别、挥发油含量、吉马酮及莪术二酮含量等方面对传统温郁金与组培温郁金进行对比研究.结果:二年生组培温郁金在性状与薄层方面与传统温郁金相似,在含量上明显高于传统温郁金;二年生组培温郁金和传统温郁金在质量上均优于一年生组培温郁金.结论:二年生组培温郁金药材质量符合要求,为组培温郁金作为郁金新药源入药提供了依据,也为组培新方法在郁金类药材中的应用提供了理论支撑.

摘要： 目的：研究温郁金醚提物中二萜类化合物C体外对人胃癌细胞（SGC-7901)的抑制作用及对Caspase-9, Caspase-3, Caspase-7和PARP蛋白表达的影响。结论：温郁金醚提物中二萜类化合物C对胃癌SGC-7901细胞的增殖有显著的抑制作用，可阻滞其细胞周期，抑制细胞增殖;并可通过上调Caspase-9, Caspase-3, Caspase-7,PARP的表达来诱导人胃癌细胞SGC-7901发生凋亡，从而发挥抗胃癌作用。

摘要： 目的：观察温郁金对胃癌细胞MMP-2和CD44v6蛋白表达的影响,探讨其抗胃癌细胞转移的作用机制。方法：以SGC-7901胃癌细胞株建立胃癌裸鼠原位移植瘤模型,将裸鼠随机分为0．9％氯化钠溶液组(对照组1及温郁金组。观察裸小鼠胃癌种植后肿瘤生长及转移灶情况,用免疫组化方法检测肿瘤组织中MMP-2和CD44v6蛋白表达的变化。结果：所有荷瘤鼠胃壁均有肿瘤生长,荷瘤率100％,温郁金组瘤重(2．73+0．92)g,对照组瘤重f4．09±1．17)g,P<0．05,抑瘤率为33．25％;温郁金组肝、腹腔和淋巴结转移比生理盐水对照组明显减少fP<0．051;温郁金治疗组瘤体中MMP．2和CD44v6的表达明显下调。结论：温郁金具有抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的作用,其作用机制可能与下调MMP-2和CD44v6的表达有关。

摘要： 目的：提纯复壮温郁金优良品种,并为温郁金优良品种的快速繁殖提供实验数据。rn 方法：通过对温郁金外植体——萌动芽进行组织培养,对诱导生长、增殖及组培苗的移栽进行研究。rn 结果：温郁金外植体在MS+6-BA5.0mg/L培养基上,萌动芽诱导效果好,时间短。在MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L培养基上丛生芽增殖效果好,增殖系数达到3.0,且有根的生长,利于移栽。

摘要： 目的：提纯复壮温郁金优良品种,并为温郁金优良品种的快速繁殖提供实验数据。方法：通过对温郁金外植体-萌动芽进行组织培养,对诱导生长、增殖及组培苗的移栽进行研究。结果：温郁金外植体在MS+6-BA5.0mg/L培养基上,萌动芽诱导效果好,时间短,在MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L培养基上丛生芽增殖效果好,增殖系数达到3.0,且有根的生长,利于移栽。

摘要： 目的：观察温郁金醚提物中二萜类化合物C(以下简称化合物C)体外对人结肠癌细胞(SW620)生长、细胞凋亡和细胞周期的影响。rn 方法：以顺铂(DDP)为阳性对照药物，采用MTT法检测化合物C对SW620细胞增殖抑制能力；An-nexin V-FITC标记流式细胞术检测化合物C对SW620细胞的凋亡抑制率，流式细胞术检测化合物C对SW620细胞周期的影响。rn 结果：MTT法显示化合物C对SW620的半数抑制率(IC50)为24.16μg/Ml，顺铂的为45.80μg/Ml；较低浓度时的抑制率与阳性对照组(DDP组)相似，在30，50，70μg/Ml浓度时的抑制率与对照组相比，差异有统计学意义(P＜0.05)；流式细胞仪检测(FCM)显示化合物C能诱导SW620细胞凋亡，其诱导凋亡率呈现一定的浓度和时间依赖性，48h后化合物C70μg/Ml组凋亡率为达到33.55％；化合物C能将SW620细胞阻滞于G1期，减少肿瘤细胞在S期和G2/M的比例。rn 结论：温郁金醚提物中二萜类化合物C能诱导SW620细胞凋亡，阻滞其细胞周期，抑制细胞增殖，是温郁金发挥抗肿瘤作用的有效成分之一。

摘要： 目的：研究温郁金醚提物中二萜类化合物C体外对人结肠腺癌SW620细胞的抑制作用及其与MAPK信号通路间的关系。rn 方法：以含10％胎牛血清的Leibovitz’s L-15为培养基，置37°C、体积分数为5％的CO2培养箱中培养SW620细胞；将温郁金醚提物中二萜类化合物C溶于二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide，DMSO)，配成10mg/mL母液；以5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil，5-FU)和奥沙利铂(Oxaliplatin，L-OHP)为阳性对照药物，采用噻唑蓝(MTT)还原法检测三种药物在10～70μg/mL浓度时对SW620细胞增殖的影响；用倒置相差显微镜观察化合物C在0，40，55，70μg/mL浓度、48h时对SW620细胞的作用效果；用流式细胞仪检测化合物C在0，40，55，70μg/mL浓度对SW620细胞周期分布的影响及其凋亡率；用Western blot法检测化合物C在0，40，55，70μg/mL浓度、48h时对SW620细胞中ERK、p-ERK、JNK、p-JNK、p38、p-p38表达的影响。rn 结果：MTT法显示化合物C能以时间-浓度依赖性方式抑制SW620细胞的增殖，与阳性对照组相比差异有统计学意义，其最高抑制率达95.302±1.482％(p＜0.01)；倒置相差显微镜下观察发现化合物C作用后的细胞呈典型的凋亡改变；流式细胞术(flow cytometry，FCM)显示化合物C能阻滞SW620细胞于G0/G1和S期，减少G2/M的比例，并诱导细胞凋亡，其最高凋亡率达98.20±0.910％；Western blot法显示化合物C对SW620细胞中ERK、JNK、p38及其相应磷酸化产物均有浓度依赖性的抑制作用，且三者磷酸化产物的抑制程度更高。rn 结论：温郁金醚提物中二萜类化合物C对人结肠腺癌SW620细胞的增殖有显著的抑制作用，阻滞其细胞周期，诱导细胞凋亡，并抑制MAPK通路中关键蛋白的表达与活化，是温郁金二萜类化合物C发挥抗肿瘤作用的机制之一。

摘要： 应用显微、薄层色谱的经典方法,对组培温郁金与传统栽培温郁金进行形态组织学及薄层色谱鉴别研究.经实验发现:显微,组培温郁金与传统温郁金植株叶片的显微特征基本相同;组培温郁金与传统温郁金植株块根的显微结构基本一致,很难找到具有强特异性或标识性的组织细胞特征,但组培温郁金植株块根中油细胞颜色较传统温郁金植株块根中油细胞颜色略深.薄层色谱法,组培温郁金与传统温郁金植株块根在TLC鉴别中,色谱图存在一定差异.可能与组培温郁金的栽种时间、栽种环境有关,但尚需进一步的实验分析.

摘要： 研究中药莪术的高效液相(HPLC)色谱指纹图谱。运用HPLC分析21个产地三种基源的莪术样品,所得结果运用“中药色谱指纹图谱计算机相似性评价系统”(MATLAB语言版本,Ver.1.240,由中南大学中药现代化研究中心开发)软件进行模式分析及相似度计算。基于模式分析(多类情况)结果将温郁金样品(1-6)归为一组,蓬莪术(7-12)归为一组,而广西莪术(13-21)因成分差异较大,无法成组。故分别建立温郁金和蓬莪术指纹图谱共有模式,并进行相似度(全谱)计算。结果温郁金样品和蓬莪术样品分别与各自的共有模式具有较高的相似度,广西莪术样品的相似度均较低。结论由于所含成分差异,中药莪术的指纹图谱分别由温郁金和蓬莪术构成两种模式,广西莪术则有待于进一步研究。

摘要： 本发明涉及一种温郁金凝集素粗品、纯品、PGRP菌株混合物的制备方法及温郁金肥料，本发明依次通过打浆、酶解、脱脂、硫酸铵沉淀、透析、冷冻干燥得到活性较大的温郁金凝集素粗品，并通过温郁金凝集素与特异性PGRP菌株之间的凝集作用实现温郁金凝集素与特异性PGRP菌株的纯化，所得到的特异性PGRP菌株混合物可用于温郁金增产。本发明所提供的分离方法，所得到的温郁金凝集素粗品活性较大，通过温郁金凝集素粗品制备的温郁金特异性PGRP菌株混合物用于温郁金培育，可以使温郁金明显增产，制备过程简单，成本低，便于产业化生产。

摘要： 本发明公开了一种温郁金胚性愈伤组织诱导与植株再生方法，属于植物组织培养技术领域。所述方法包括：(1)取温郁金块茎上的幼芽，消毒后用无菌水冲洗，再接种于幼芽培养基中培养获得温郁金无菌幼苗；(2)将无菌幼苗转移至丛生芽诱导培养基中培养，得到无菌丛生幼苗；(3)取无菌丛生幼苗的根基部作为外植体，接种于愈伤组织诱导培养基中，暗培养得到温郁金胚性愈伤组织；(4)取温郁金胚性愈伤组织接种于分化培养基中培养，得到温郁金再生植株。本发明对温郁金幼芽采取多步骤消毒，实现快速、有效脱毒；状态良好的胚性愈伤组织是分化再生的关键步骤，本发明提供的愈伤组织诱导培养基诱导胚性愈伤组织生成率达到95％左右。

摘要： 本发明公开了一种温郁金毛状根的诱导方法，包括以下步骤：1）侵染液的制备；2）活体组培苗的培养；3）毛状根的诱导；4）毛状根的脱菌培养及繁殖。本发明首先利用温郁金的内生菌侵染组培苗，作为发根农杆菌的受体，再利用发根农杆菌活体侵染温郁金活体组培苗的茎段，实现高效诱导出毛状根，为利用温郁金毛状根诱导体系生长药用成分提供技术支撑。

摘要： 本申请提供了一种提高莪术醇利用率的温郁金挥发油包合物的制备方法，所述方法包括如下步骤：(1)准备温郁金挥发油；(2)将β‑环糊精制备成为环糊精水饱和溶液；(3)将步骤(1)的温郁金挥发油溶于有机溶媒中；(4)将步骤(3)溶于有机溶剂的温郁金挥发油在一定温度下加入到步骤(2)的环糊精水饱和溶液中，搅拌一段时间使其充分包合；(5)将步骤(4)得到的溶液于0‑4°C静置12‑48小时，过滤、有机溶剂洗涤、烘干；所述步骤(3)中的有机溶媒为无水乙醇和乙醚的混合溶液，所述无水乙醇和乙醚的体积比为1‑5：1。

摘要： 本发明公开了一种温郁金趁鲜加工装置及趁鲜加工方法，旨在提供一种能够有效解决目前的离心切片机对温郁金进行加工的过程中，碎片易卡在刀片与机壳内侧壁之间并逐渐聚集，难以清理造成细菌滋生，影响饮片质量的问题的温郁金趁鲜加工装置，以及有效解决目前温郁金加工过程易霉变，易碎片，易含量损失的问题的温郁金趁鲜加工方法。温郁金趁鲜加工装置包括离心切片机，离心切片机包括机架、设置在机架上的机壳、设置在机壳内的转盘、转动式刀盘、刀片、撞击驱动板及定位阻尼装置。温郁金趁鲜加工方法依次包括：新鲜温郁金药材洗净，置高压蒸汽锅内高温蒸；晾至含水量50%，趁鲜切片。

摘要： 本发明公开了一种温郁金组织培养的方法，主要包括块茎砂床催芽、不定芽诱导、继代增殖、生根培养和假植等步骤。采用本发明方法，培养过程中污染率小于5％，不定芽诱导率达到129％以上，芽增殖倍数达到7.5以上，成活率达到95％以上，挥发油含量达到5.4％以上。该方法操作简便，效果显著，可在短时间内大量提供优质的温郁金种苗，适合产业化推广使用。

摘要： 本发明涉及一种温郁金凝集素粗品、纯品、PGRP菌株混合物的制备方法及温郁金肥料，本发明依次通过打浆、酶解、脱脂、硫酸铵沉淀、透析、冷冻干燥得到活性较大的温郁金凝集素粗品，并通过温郁金凝集素与特异性PGRP菌株之间的凝集作用实现温郁金凝集素与特异性PGRP菌株的纯化，所得到的特异性PGRP菌株混合物可用于温郁金增产。本发明所提供的分离方法，所得到的温郁金凝集素粗品活性较大，通过温郁金凝集素粗品制备的温郁金特异性PGRP菌株混合物用于温郁金培育，可以使温郁金明显增产，制备过程简单，成本低，便于产业化生产。

摘要： 本发明公开一种从温郁金中分离的芽孢杆菌WYJ‑E14及其在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明从温郁金的根茎部位分离的一个内生菌属于：贝莱斯芽孢杆菌。贝莱斯芽孢杆菌在自然界中广泛分布，具有快速生长和遗传稳定的良好特性，对人类和动物无害，不污染环境。其代谢产物丰富，具有广谱抗菌活性和较强的抗应激能力，在农业、环境和发酵工业等许多领域发挥着越来越重要的作用。本发明中，贝莱斯芽孢杆菌WYJ‑E14具有极显著的抗肿瘤细胞的功效，其在生物抗肿瘤药物的开发方面具有很高的应用价值。

摘要： 本发明公开一种温郁金来源的姜黄素合成酶、基因、载体、工程菌及应用。姜黄素合成酶的氨基酸序列为SEQ.IDNO.2所示。其基因序列为SEQ.IDNO.1所示。构建的重组载体为pYES2::CwPKS。重组基因工程菌为SaccharomycescerevisiaeBY4741/pESC‑LEU::At4CL‑ClDCS/pYES2::CwPKS。本发明携带温郁金来源的姜黄素合成酶工程菌具有利用阿魏酸生成的姜黄素、利用阿魏酸和香豆酸生成单去甲氧基姜黄素，利用二氢香豆酸生成四氢双去甲氧基姜黄素的能力；能在酵母细胞中快速，大量地制备所述的催化剂，用于姜黄素类化合物的大量合成。

摘要： 本发明提供温郁金凝集素高纯品的制备方法及应用，其特征在于具有以下步骤，①样品处理：温郁金根茎鲜品去皮、粉碎，Tris‑HCl缓冲液低温浸提；②粗品制备：固体硫酸铵沉淀，透析；③半成品制备：粗品使用纤维素阴离子交换色谱DEAE‑52柱分离纯化；④纯品制备：半成品使用葡聚糖凝胶色谱Sephadex G‑75柱分离纯化，得温郁金高纯品凝集素WLT。本发明制备的温郁金纯品凝集素分子量约为28 KDa，属甘露糖结合型的天然蛋白，具有广谱抗肿瘤活性。因而，本发明制备的凝集素产品可作为抗肿瘤药物研发的新药源，有利于加速新颖性天然蛋白药物的开发。