克隆

摘要： 【目的】分析鹅p21基因的结构和启动子活性,探讨p21基因的转录调控机制。【方法】以泰州鹅为试验对象,通过同源克隆、RACE和生物信息学分析等方法获得鹅p21基因全长序列和5′-侧翼区序列特征;构建6个不同缺失片段的启动子区双荧光素酶报告载体并分析其荧光素酶活性,进而确定p21基因核心启动子区;对核心启动子区转录因子结合位点生肌决定因子(MyoD)(+25~+36 bp)进行定点突变,并构建突变报告基因载体,在C2C12细胞系内初步鉴定鹅p21基因核心转录调控因子。【结果】鹅p21基因cDNA全长1943 bp,CDS区大小为453 bp,编码151个氨基酸,蛋白序列包含高度保守的CDI家族结合位点。系统进化树分析表明,鹅p21基因与鸭亲缘关系最近,与鸡和火鸡有较强的进化关系。鹅p21基因5′-侧翼区包含启动子元件,-35~+37 bp是核心启动子区,发挥正向调控作用,结合定点突变技术初步鉴定MyoD是鹅p21基因核心转录调控元件。【结论】本研究获得了鹅p21基因完整的cDNA序列和启动子区域,MyoD是p21基因核心转录调控因子,为探究p21基因在鹅胚胎期肌肉发育过程中的调控机制提供理论依据。

摘要： 【目的】探明马铃薯StWRKY转录因子的生物信息学特征及其在不同组织、低温和盐胁迫下的表达模式,揭示StWRKY转录因子在逆境下的调控规律,为进一步研究此转录因子的功能奠定基础。【方法】本试验以冀张薯12号马铃薯组培苗为材料,从马铃薯中克隆获得StWRKY基因,并对其进行生物信息学分析和功能的初步研究。【结果】StWRKY基因长度为747 bp,由172个氨基酸编码而成,相对分子量19921.58,理论等电点9.22,带负电残基总数21,带正电残基总数28,不稳定系数40.56。该蛋白质二级结构以无规曲线为主占40.1%,α-螺旋为37.4%、伸展链为15.1%、β-折叠为7.6%,是不稳定蛋白,属于亲水蛋白。通过进化树分析,与番茄同源性最高,为97.1%;利用RT-qPCR分析表明,表达谱分析中StWRKY基因的表达量在叶片中最高;功能初步分析,StWRKY基因的表达量在经过低温胁迫和盐胁迫处理6和7 h表达量显著增加,说明可能参与马铃薯对盐胁迫和低温的响应路径。【结论】StWRKY能够不同程度响应盐胁迫和低温胁迫,说明在马铃薯逆境反应机制中发挥不同作用,初步揭示了马铃薯StWRKY转录因子的功能,为进一步研究其功能提供依据。

摘要： 文章以五年级《克隆飞机大战》教学为例,以Scratch搭建平台,结合小学生的逻辑思维发展特点、认知特点、已有的认知水平及生活经验,探讨如何通过编程来设计游戏,如何在课堂教学中关注学生信息核心素养的培养、计算思维能力的提升,从而为后续Scratch编程教学及培养学生的编程兴趣奠定基础。

摘要： 【目的】探究CC趋化因子受体7(CC chemokine receptor 7,CCR7)基因编码蛋白的生物学特性及其mRNA在健康和炎性奶牛乳腺组织中的表达量。【方法】使用PCR扩增并克隆中国荷斯坦奶牛CCR7基因CDS区,测序后进行相似性比对及系统进化树构建;使用多种生物信息学软件分析CCR7蛋白的组成、理化性质及结构等;使用实时荧光定量PCR技术检测CCR7基因在健康和炎性奶牛乳腺组织中的表达差异。【结果】中国荷斯坦奶牛CCR7基因CDS区全长1325 bp,与绵羊的相似性较高(95.2%),亲缘关系较近;与鸡的相似性较低(56.4%),亲缘关系较远。CCR7基因编码379个氨基酸,其中亮氨酸含量最多,缬氨酸含量次之,组氨酸和色氨酸含量最低;CCR7蛋白分子质量为14.56 ku,理论等电点为8.89,平均亲水系数为0.640,是一种跨膜疏水性蛋白。CCR7蛋白信号肽切割位点可能存在于第24和25位氨基酸之间。CCR7蛋白二级结构中α-螺旋占比最大,高达51.72%,三级结构主要为α-螺旋和无规则卷曲。CCR7基因在炎性奶牛乳腺组织中的表达量极显著高于健康乳腺组织(P<0.01),其可能在奶牛乳腺炎的免疫调控中有着重要的作用。【结论】试验成功克隆出牛CCR7基因CDS区序列,并进行了相应的生物信息学分析及组织定量表达,为进一步研究CCR7基因的具体功能提供材料,对于探究CCR7基因在奶牛乳腺炎中的调控功能具有重要的意义。

摘要： 【目的】为探明苹果属植物响应脱落酸信号的分子机制。【方法】根据拟南芥PP2C A亚家族基因编码区序列进行同源性分析,利用RT-PCR技术,从‘平邑甜茶’cDNA中得到并克隆了3种MhPP2C基因,随后利用生物信息学手段分析其序列特征。【结果】分离得到的3种PP2C A亚家族基因MhABI1、MhABI2和MhHAB分别编码552,552和544个氨基酸的亲水性蛋白,其预测表观相对分子量分别为59.38、59.44、58.26 kDa,理论等电点为4.52~5.03;其中1个稳定蛋白和2个不稳定蛋白。这3个蛋白均含有PP2C超家族保守功能结构域,无跨膜结构及信号肽序列,主要定位于细胞核。【结论】这3种苹果属PP2C A亚家族基因可能在苹果砧木‘平邑甜茶’ABA信号网络中发挥重要作用。

摘要： 开花是高等植物内部遗传因素和外界环境因素共同调节完成的复杂生命过程,是植物进入生殖生长从而具备遗传能力和繁殖能力的象征。使用PCR技术,以楸树(Catalpa bungei)混合芽cDNA为模板分别克隆CbuATX1,CbuATX1-like和CbuATX23个基因,并利用相关生物信息学软件对这3个基因编码的蛋白质结构进行预测,同时对基因的启动子序列进行顺式作用元件分析,通过qRT-PCR技术检测3个基因在楸树混合芽不同发育时期的表达量。结果表明:CbuATX1的CDS全长为726 bp,编码241个氨基酸,存在跨膜运输结构,属于HMA蛋白家族,与芝麻(Sesamum indicum)、甜菜(Beta vulgaris)亲缘关系较近。CbuATX1-like的CDS全长为801 bp,编码266个氨基酸,存在跨膜运输结构,属于HMA蛋白家族,与胡萝卜(Daucus carota)、欧洲橄榄(Olea europaea)亲缘关系较近。CbuATX2的CDS全长为1554 bp,编码517个氨基酸,不存在跨膜运输结构,属于PWWP蛋白家族,与马尾草(Erythranthe guttatus)亲缘关系较近。这3个基因启动子均含有多个真核生物启动子的基本元件,如CAAT-box和TATA-box等,此外,还含有光响应、低温响应、生长素响应,以及与干旱诱导相关的MYB结合位点等3个基因与光响应密切相关,还可能参与外界环境胁迫响应等过程。qRT-PCR结果显示,上述3个基因在1年生普通楸树无性系9-1和突变株系-百日花楸树不同发育时期的表达量呈现显著差异。通过以上研究以期能够进一步阐述百日花楸树开花的性状,为楸树开花机制的研究和楸树的定向遗传改良提供理论支持。

摘要： [目的]对苋菜MDH基因进行克隆及生物信息学分析。[方法]以苋菜试管苗为材料,从实验室构建的苋菜转录组数据库中筛选出苋菜MDH基因的c DNA序列片段,采用RT-PCR技术对其ORF进行克隆,并进行生物信息学分析。[结果]MDH基因编码344个氨基酸,通过生物信息学分析表明,MDH可能为非分泌蛋白,包括33个磷酸化位点,二级结构以α螺旋为主,三级结构是由无规则卷曲结构、α螺旋和β折叠构成的,与藜麦有较近的进化关系,在黑暗条件下和叶片红色部位表达更显著开花期较其他生长时期表达更显著。[结论]为将来深入研究MDH基因功能奠定基础。

摘要： 为了研究髓细胞组织增生蛋白(Myelocytomatosis protein,MYC2)基因与甘蓝型油菜抗虫性的关系,该研究从甘蓝型油菜恢复系R18中克隆获得BnMYC2基因的cDNA序列,并进行了基因表达及转化模式植物拟南芥的抗虫分析。生物信息学分析表明,BnMYC2基因gDNA不具有内含子结构,cDNA完整开放阅读框(ORF)为1833 bp,编码610个氨基酸,推测BnMYC2基因位于甘蓝型油菜C6染色体上,具有bHLH型转录因子的保守结构域HLH。基因同源性分析结果表明,BnMYC2与拟南芥、甘蓝、萝卜的亲缘关系最近,氨基酸的相似度都在98%以上。组织特异性表达分析显示,BnMYC2在甘蓝型油菜的根、茎、叶、花、授粉后27 d的果荚和授粉后35 d的果荚中均有表达,且授粉后27 d的果荚中的表达水平最高。抗虫胁迫实验的结果显示,过表达BnMYC2拟南芥的抗虫基因VSP2的表达水平显著高于对照,推测甘蓝型油菜BnMYC2基因可能作为重要的调节因子参与虫害胁迫响应;MeJA诱导6 h后,VSP2基因在不同基因型拟南芥的表达量都明显增加,与诱导前相比差异显著,表明BnMYC2正向调控VSP2基因的表达,推测BnMYC2通过调控包括VSP2在内的多个标记基因的表达使植物响应虫害胁迫。

摘要： 旨在克隆山羊RPL26基因序列并对其在山羊各组织中的表达情况和对山羊脂肪细胞分化的调控作用进行探究。本研究以1周岁简州大耳羊公羊作为试验对象(健康生长状态良好,体重约50 kg,n=3),利用RT-PCR等方法克隆RPL26序列,对基因及蛋白质序列进行生物信息学分析;以山羊各组织cDNA为模板,利用qPCR方法构建组织表达谱;利用双酶切方法构建RPL26过表达载体,通过脂质体转染在山羊肌内脂肪细胞中过表达RPL26,诱导分化后利用油红O染色和Bodipy染色观察细胞形态学变化,qPCR检测过表达效率及成脂相关基因的表达情况,以阐明其对肌内脂肪细胞分化的影响。结果表明,克隆获得山羊RPL26序列544 bp,CDS区为438 bp,编码蛋白质为带负电的不稳定亲水性蛋白质,主要定位于细胞核。RPL26在山羊各组织广泛表达,其中以腹部皮下脂肪和背部皮下脂肪表达量较高,极显著高于其他组织(P<0.01)。在山羊肌内脂肪细胞中过表达RPL26,肌内脂肪细胞的脂滴明显增多,油红O染色OD值极显著上升;qPCR结果显示,Pref1表达水平极显著下降(P<0.01),PPARγ等成脂标志基因及LPL等脂代谢标志基因的表达都极显著上升(P<0.01)。本研究克隆获得了山羊RPL26序列544 bp,CDS区为438 bp,在腹部皮下脂肪中表达量最高,RPL26对山羊肌内前体脂肪细胞的分化有着正向调控作用。

摘要： 【目的】对毛囊角蛋白关联蛋白11.1(keratin associated protein 11.1,KAP11.1)基因进行克隆及原核表达,并对KAP11.1基因在不同品种绵羊皮肤毛囊中表达量进行比较,探究KAP11.1基因在南疆地方绵羊品种间表达差异及其对羊毛品质的影响。【方法】以平原型和田羊、山区型和田羊和卡拉库尔羊体侧皮肤毛囊为研究材料,以GenBank中绵羊KAP11.1基因序列(登录号:HQ595347.1)为参照设计引物,对KAP11.1基因进行PCR扩增,构建pMD19-T-KAP11.1克隆质粒,双酶切鉴定后构建pET-28a(+)-KAP11.1原核重组表达质粒,经PCR和双酶切鉴定后测序并进行序列分析,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中表达,采用SDS-PAGE和Western blotting检测;利用实时荧光定量PCR技术检测KAP11.1基因在不同绵羊皮肤毛囊中的表达情况。【结果】3种绵羊KAP11.1基因CDS区序列为480 bp,编码159个氨基酸,为不稳定的疏水蛋白。相似性比对结果发现,与参照基因相比,2种类型和田羊基因序列相似性均为99.79%,均在423 bp处发生突变,由C变为T,卡拉库尔羊基因序列相似性为99.38%,其69 bp处G变为T、93 bp处C变为T、423 bp处C变为T。系统进化树分析发现,3种绵羊和山羊亲缘关系最近,和瘤牛亲缘关系最远。KAP11.1蛋白二级结构主要由无规则卷曲组成。试验成功构建了pET-28a(+)-KAP11.1原核重组表达质粒,并纯化得到19 ku的KAP11.1蛋白。KAP11.1基因在山区型和田羊和卡拉库尔羊皮肤毛囊中的表达量均显著高于平原型和田羊(P0.05)。【结论】克隆获得480 bp的绵羊KAP11.1基因CDS区序列,成功构建了pET-28a(+)-KAP11.1原核重组表达质粒,并获得19 ku的KAP11.1蛋白,且KAP11.1基因在3个品种绵羊皮肤毛囊中均有表达。

摘要： 本试验采用B超联合猪早孕检测试剂盒对受体母猪进行妊娠诊断，以期确定克隆五指山小型猪早期妊娠诊断的适宜时间，为克隆五指山小型猪受体妊娠诊断提供依据。

摘要： ADRP最初是通过差别杂交筛选技术，从小鼠脂肪细胞的cDNA文库中分离而来，其mRNA在脂肪细胞分化的第l天即增加50-100倍，所以ADRP不仅是形成细胞内脂滴的主要成分，也是脂肪细胞内脂质沉积的重要标志之一。ADRP是脂肪细胞早期分化的标志，它与胞浆脂肪滴沉积和转运有关。并参与形成脂肪贮存囊泡及控制甘油三酯的利用。同时ADRP是脂肪细胞特有的脂肪酸结合蛋白，可促进长链游离脂肪酸的转运，并可能有脂肪酸受体蛋白的功能，因此在动物产品品质研究方面有广阔的应用前景。本研究采用RT-PCR技术克隆了西农萨能奶山羊ADRP基因的cDNA序列，并且通过RT-qPCR技术检测了该基因在山羊各组织中的表达谱，为其功能研究提供参考。

摘要： 本研究以犬细小病毒(Canine parvovirus，CPV)阳性病犬血清中的CPV基因组DNA为模板，成功克隆出CPV-VP2基因，并对其进行生物学分析。测序结果表明，CPV-VP2完整的开放阅读框大小为1755 bp，共编码585个氨基酸残基。CPV-VP2基因与浣熊(M24005)的VP2基因同源性最高，水貂(FJ712219)和猫(M10824)的居中，与猪、奶牛、牛、鼠、鹅、鸡、人和松鼠的VP2丛因同源性较低：CPV-VP2蛋白质中无信号肽;大多数氨基酸偏好以T、A结尾的密码子：CPV-VP2蛋白可能存在7个糖基化位点，其丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸分别存在8、10、7个磷酸化位点，可能存存76个抗原表位。预测CPV-VP2蛋白为亲水性蛋白，无跨膜结构。预测到CPV-VP2蛋白的二级结构的α-螺旋区域占9．93％、β-折叠区域占24．49％、无规则卷曲区域占65．58％，三级结构存在多个螺旋和折叠区域，主要以无规则卷曲为主。三研究为CPV-VP2在原核或真核中的高效表达提供参考，并为制备CPV胶体金快速诊断试纸条和基因工程疫苗提供有益借鉴。

摘要： 根据国内外已发表鹅源小鹅瘟病毒(GPV)与番鸭细小病毒(MDPV)全基因序列，应用DNAStar分子生物学软件设计一对引物，应用高保真PCR技术扩增番鸭源小鹅瘟病毒PT株(GPV-PT株)结构蛋白VP全基因序列。将扩增得到的VP全基因克隆到pMD18-T载体上，获得的重组质粒经PCR鉴定后进行序列测定。结果表明PT株VP全基因大小为2199bp。编码732个氨基酸，与番鸭源小鹅瘟病毒GPV-DY株核苷酸及其推导氨基酸同源性分别为98．8％和98．6％，高于鹅源GPV与MDPV参考毒株。在国内外首次发现番鸭源GPV VP基因VP1独特区具有MDPV核苷酸序列特征，而VP2基因具有鹅源GPV核苷酸序列特征。

摘要： 为了给猪圆环病毒2型的诊断和基因工程疫苗的研究奠定基础，试验根据GertBank中猪圆环病毒2型的核酸序列设计了1对引物，采用PCR方法从疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的死亡仔猪病料组织中扩增出了ORF2基因，将其克隆到pMD18-T载体上，筛选获得了重组质粒pT—ORF2,结果表明：以重组质粒pT-ORF2为模板设计出1对引物，扩增出含ORF2主要抗原位点的区段566bp，经Bam H Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切。将回收的ORF2基因转移入真核表达载体pcDNA3.0，构建了重组表达质粒pcDNA3.0-ORF2，然后将重组质粒真核表达载体转染到BHK-21细胞中并成功的进行了真核表达。

摘要： 自从2002年美国Rassman博士提出了FUE(毛囊单位抽取术)的概念和方法以来，无痕毛发移植(S.H.T)便开始应用于临床。2007年中国也开始使用此技术，但开展的单位很少。本文介绍了无痕毛发移植术的十大优点，植发术在技术结合和毛囊培养与克隆上的两个进展。

摘要： 2010年4月至11月，江苏等地鸭、鹅发生了一种以产蛋率、采食量显著下降，出现脑炎样神经症状为特征的传染病。该病由一种新型鸭鹅黄病毒感染造成，暂称为脑炎一卵巢炎综合征。为分析该病毒的遗传变异和进化关系，采用 RT—PCR方法测定1株鹅黄病毒全基因序列。研究结果表明，基因组全长10，916个核苷酸，包含1个长度为10，278bp的阅读框，编码3425个氨基酸。该毒株与分离自鸭的BYD病毒的核苷酸和氨基酸同源性均为99．6％，表明鸭源和鹅源的黄病毒是同一种病毒。与Bagaza病毒和Rocio病毒全序列的核苷酸同源性分别为72．7％和65．5％。其E基因与黄病毒属Ntaya病毒群Tembusu病毒的同源性较高，为87．0％~90．8％。基因系统进化树分析也表明，鹅黄病毒JS804毒株与黄病毒属Ntaya病毒群，尤其是与Tembusu病毒有很高的亲缘关系。

摘要： 炎症和免疫反应是一种常见的病理过程。除了人们所熟知的感染性疾病外，风湿性关节炎、类风湿疾病、系统性红斑狼疮、肝纤维化、动脉粥样硬化、心肌梗塞、阿尔茨海默病以及恶性肿瘤等多种疾病也与炎症密切相关。炎症免疫因素参与了这些疾病的发生、发展及转归整个过程。巨噬细胞是机体免疫系统的一种重要细胞，不仅具有很强的吞噬功能，而且是主要的抗原提呈细胞，在多种炎症和免疫反应中起关键作用。

摘要： 本发明目的是利用人类白细胞抗原(HLA)一致的活性淋巴细胞使造血干细胞移植后附着生长稳定。从末梢血或脐带血分离获得的单核球细胞中的HLA一致淋巴细胞经增殖、活化后，进一步分离提纯，制备以HLA一致淋巴细胞为主要成分的造血干细胞移植后附着生长稳定的组合物。该组合物可以广泛应用于预防造血干细胞移植后附着生长不全及促进造血干细胞移植后附着生长的治疗。本发明中组合物的给药量因患者的年龄、症状而异，对于包括人在内的哺乳动物，人源抗体的给药量为0.2－20毫克/千克体重·天。给药可经静脉注射，每日一次(单次给药或连续给药)或间隔性地每周1－3次，每2周或每3周1次。

摘要： 本发明公开一种用于制备单增李斯特菌单克隆抗体的抗原，所述抗原的氨基酸序列为SEQ NO.1。本发明通过筛选、实验验证获得一段能够代表单增李斯特菌的特异性表面蛋白片段，以这一段特异性表面蛋白片段作为抗原序列采用细胞融合得到阳性细胞株，经过三轮亚克隆后，利用间接ELISA法检测阳性菌株并检测其分泌抗体与其他食源性致病菌株的交叉反应，获得特异性融合细胞株，最终得到了效价高、特异性好的一株单克隆杂交瘤细胞，制备了鼠单克隆抗体，效价为810000，特异性良好。本发明的单克隆抗体灵敏度较高，特异性好，稳定性强。

摘要： 本发明公开一种用于制备单增李斯特菌单克隆抗体的抗原，所述抗原的氨基酸序列为SEQ NO.1。本发明通过筛选、实验验证获得一段能够代表单增李斯特菌的特异性表面蛋白片段，以这一段特异性表面蛋白片段作为抗原序列采用细胞融合得到阳性细胞株，经过三轮亚克隆后，利用间接ELISA法检测阳性菌株并检测其分泌抗体与其他食源性致病菌株的交叉反应，获得特异性融合细胞株，最终得到了效价高、特异性好的一株单克隆杂交瘤细胞，制备了鼠单克隆抗体，效价为810000，特异性良好。本发明的单克隆抗体灵敏度较高，特异性好，稳定性强。

摘要： 本发明提供了一种制备右佐匹克隆晶型A、基本上化学纯的右佐匹克隆、或者具有低含量的残留溶剂(一种或多种)的右佐匹克隆的方法。本发明还提供了具有低含量的残留溶剂(一种或多种)的右佐匹克隆。本发明还提供了一种用于右佐匹克隆游离碱的光学富集的方法。例如，本发明一种实施方案是涉及一种制备右佐匹克隆晶型A的方法，其中该方法包括从溶剂中结晶右佐匹克隆游离碱，该溶剂选自异丙醇(IPA)，甲基异丁基酮(MIBK)，丙酮，正丁醇，异丁醇异丁醇，2－丁醇，四氢呋喃(THF)，碳酸二甲酯，甲醇，乙醇，乳酸乙酯，二甲基甲酰胺(DMF)，四氯化碳，甲苯，乙酸异丁酯和其混合物。

摘要： 本发明属于生物学和体外诊断试剂技术领域，涉及一种分泌鼠抗人IgG单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其分泌的单克隆抗体和应用。所述分泌鼠抗人IgG单克隆抗体的杂交瘤细胞株命名为杂交瘤细胞株18A10，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2021184。该杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体为鼠抗人IgG单克隆抗体，具有高效价、高亲和力和高特异性，在抗体稳定性方面，有很好的性能。该抗体可用于血清中人IgG抗体的检测，可用于一些体外诊断试剂盒中。

摘要： 本发明公开了一种分泌磷酸双(1,3‑二氯‑2‑丙基)酯单克隆抗体的杂交瘤细胞株、单克隆抗体及应用。该杂交瘤细胞株命名为杂交瘤细胞株6F7，保藏编号为CCTCC NO：C2021137。该杂交瘤细胞株能够产生磷酸双(1,3‑二氯‑2‑丙基)酯单克隆抗体，该抗体具有特异性识别并高亲和力结合磷酸双(1,3‑二氯‑2‑丙基)酯抗原的能力，可用于磷酸双(1,3‑二氯‑2‑丙基)酯的检测。

摘要： 本申请涉及单克隆抗体领域，更具体地说，它涉及PPD‑L1单克隆抗体、重链、轻链可变区、单克隆细胞株及运用和试剂盒，重链可变区包括如下互补决定区：CDRH1：DIYMH；CDRH2：RIGPANGDIKYDPKFQG；CDRH3：YGSYFAMDY；轻链可变区包括如下互补决定区：CDRL1：RASGNIHNYLA；CDRL2：NAKTLAD；CDRL3：QHFWSTPYT。本申请中的抗体对PD‑L1抗原具有良好的特异性和结合性，具有广阔的运用前景。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体公开一种分泌胰岛素单克隆抗体杂交瘤细胞株及其单克隆抗体与应用。杂交瘤细胞株包括保藏编号为GDMCC NO：62021的杂交瘤细胞株Mab0329.11‑G9‑A5、保藏编号为GDMCC NO：62085的杂交瘤细胞株Mab0329.11‑G9‑B7。本发明通过获得分泌抗胰岛素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，获得针对胰岛素不同抗原表位获得两种单克隆抗体，该单克隆抗体特异性强、亲和力好、效价较高，可以准确检测出血清或血浆中的胰岛素含量，有利于检测胰岛素含量变化或诊断以胰岛素异常表达为表征的疾病。

摘要： 本发明公开了一种分泌磷酸二(2‑乙基己基)酯单克隆抗体的杂交瘤细胞株、单克隆抗体及应用。该杂交瘤细胞株命名为杂交瘤细胞株2D5，保藏编号为CCTCC NO：C2021136。该杂交瘤细胞株能够产生磷酸二(2‑乙基己基)酯单克隆抗体，该抗体具有特异性识别并高亲和力结合磷酸二(2‑乙基己基)酯抗原的能力，可用于磷酸二(2‑乙基己基)酯的检测。

摘要： 本发明涉及病毒培养技术领域，具体涉及BHK‑21细胞克隆株及利用BHK‑21细胞克隆株全悬浮培养新城疫病毒的方法。本发明提供BHK‑21细胞克隆株QYHZZ‑BHK‑21，其保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2021133。该BHK‑21细胞克隆株能够在全悬浮无血清培养过程中快速增殖，保持较高的细胞活率，在接种新城疫病毒后，能够使得病毒快速繁殖，在较短时间内获得较高的病毒HA效价，制备得到的新城疫病毒抗原的质量较好，具有较高的免疫原性和安全性。本发明提供的全悬浮无血清培养方法适用于新城疫病毒及其疫苗的规模化生产，为细胞源疫苗的生产提供了技术基础。