水飞蓟宾通过诱导活性氮生成增多介导人表皮癌A431细胞死亡

摘要

目的采用天然药物提取物水飞蓟宾作用于人表皮癌A431细胞,考察药物诱导细胞内生成活性氮(reactive nitrogen species,RNS)的来源及其在诱导细胞凋亡过程中所起的调控作用。方法采用噻唑蓝比色法、流式细胞术及一氧化氮(nitric oxide,NO)试剂盒检测法等方法考察药物对细胞的生长抑制、RNS生成、线粒体损伤及凋亡等影响。结果及结论水飞蓟宾可浓度依赖性诱导A431细胞生长抑制;在此过程中细胞内RNS及NO水平增高,一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制剂或NO抑制剂的加入可逆转这一现象的发生;同时,N-硝基-L-精氨酸甲酯(Nnitro-L-arginine methyl ester,L-NAM E)及一氧化氮清除剂PTIO可显著逆转水飞蓟宾诱导的细胞凋亡。说明水飞蓟宾可能是通过激活内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS)而诱导细胞内NO水平增高,并通过线粒体途径促进了细胞凋亡的发生。